Génération et caractérisation de sphéroïdes à partir de lignées thyroïdiennes humaines

Abstract

Introduction

La culture cellulaire en trois dimensions (3D) s’est imposée comme un modèle pertinent en oncologie, notamment grâce à la formation de sphéroïdes, meilleurs représentants des interactions complexes au sein des tissus humains que les modèles 2D traditionnels. Peu de données concernent toutefois les cancers thyroïdiens. Cette étude vise à générer et caractériser des modèles 3D de sphéroïdes issus de différentes lignées thyroïdiennes.

Matériel et Méthodes

Six lignées cellulaires humaines dérivées de cancer non médullaire de la thyroïde (ARO, FTC-133, B-CPAP, TPC-1, NPA, XTC) ont été cultivées en 3D dans des plaques à faible adhérence cellulaire (Nunclon™ Sphera™). Leur capacité de formation, le diamètre et le volume des sphéroïdes ainsi que la viabilité cellulaire (Cell Titer Glo 3D, Promega) ont été évalués. Une analyse comparative 2D/3D par RT-qPCR des marqueurs de différenciation (TPO, TSHr, NIS, Tg, TTF1, PAX8) a également été réalisée.

Résultats

Quatre lignées ont formé des sphéroïdes reproductibles, à partir de 4 jours de culture (B-CPAP, FTC-133, XTC) ou après une semaine pour la lignée NPA. Les lignées ARO et TPC-1 n’ont pas généré de structures stables. Le diamètre moyen variait entre 710 et 1020 μm. Les premiers résultats transcriptomiques suggèrent une redifférenciation partielle en 3D dans certaines lignées, notamment une augmentation importante de l’expression du récepteur de la TSH dans la lignée FTC-133.

Conclusion

Cette étude montre la faisabilité de la culture 3D de cellules thyroïdiennes malignes avec un modèle semblant prometteur pour l’étude du micro-environnement tumoral et les évaluations thérapeutiques.