Contribution des lymphocytes T folliculaires dans la fibrogenèse au cours de la sclérodermie systémique

Abstract

Introduction

La sclérodermie systémique (ScS) est une maladie auto-immune complexe caractérisée par une atteinte de la microcirculation, la présence d’anomalies de l’immunité humorale et cellulaire et une accumulation anormale de protéines de la matrice extracellulaire (MEC) responsable d’une fibrose cutanée et organique. Si sa physiopathologie reste partiellement élucidée, plusieurs études ont mis en évidence le rôle joué par les cellules de l’immunité adaptative, dont les lymphocytes T folliculaires helper (TFH) et T follicular peripheral (TPH) dans la survenue des phénomènes inflammatoires et de la fibrose. La fréquence des TFH circulants est augmentée dans la ScS. Une infiltration en lymphocytes TFH a également été identifiée dans les lésions cutanées des patients sclérodermiques. In vitro, la coculture des lymphocytes TFH avec des fibroblastes cutanés normaux a induit la différenciation de ces derniers en myofibroblastes, suggérant leur implication dans les mécanismes de la fibrose. Cependant, les mécanismes mis en jeu par les lymphocytes TFH dans la survenue de la fibrose restent non entièrement élucidés. Les lymphocytes TPH partagent des caractéristiques communes avec les lymphocytes TFH et sont capables d’interagir avec les lymphocytes B via la sécrétion d’IL-21 notamment. La fréquence de ces lymphocytes semble augmentée dans la circulation des patients sclérodermiques. Seulement peu de données sur leurs caractéristiques sont disponibles. L’objectif de cette étude était de décrire les lymphocytes TPH dans la ScS puis d’étudier l’interaction in vitro entre les lymphocytes TFH ainsi que les lymphocytes TPH et les fibroblastes dermiques humains.

Patients et méthodes

Les échantillons sanguins de 25 patients atteints de ScS et de 19 témoins sains ont été analysés afin de déterminer la fréquence et les caractéristiques phénotypiques des lymphocytes TFH et TPH circulants par cytométrie de flux. Par la suite, des fibroblastes cutanés normaux et de patients sclérodermiques ont été stimulés in vitro par 10 ng/mL d’IL-4 et d’IL-21 en association ou non avec 5 ng/mL de TGF-b pendant 24 h. Des cocultures entre lymphocytes TFH, TPH et fibroblastes normaux ont été réalisées durant 6 jours, en présence ou non de TGF-b (5 ng/mL).

Résultats

La fréquence des lymphocytes TFH et TPH était augmentée dans la circulation sanguine des patients ScS. Elle était positivement corrélée au score de Rodnan modifié et négativement à la capacité vitale forcée. In vitro, l’IL-4 et non l’Il-21 induisait une augmentation significative de l’expression génique du COL1A1 et de l’IL-6 par les fibroblastes cutanés normaux en association ou non au TFG-b à 24 h. En comparaison, les fibroblastes de patients présentaient de plus grandes capacités à exprimer BAFF ou encore l’IL-6 dans les mêmes conditions. La coculture des lymphocytes TFH (n = 3) avec des fibroblastes cutanés normaux conduisait à une augmentation significative de l’expression génique de BAFF (p = 0,023) et de l’IL-6 en présence de TFG-b (p = 0,023). De même la coculture entre lymphocytes TPH et les fibroblastes induisait une augmentation de l’expression génique de l’IL-6 avec (p = 0,082) ou sans (p = 0,082) TGF-b.

Discussion

Les lymphocytes TFH et TPH jouent un rôle important dans la différenciation des lymphocytes B et dans leur sécrétion d’anticorps. En accord avec les données précédemment publiées, nous mettons en évidence une augmentation de leur fréquence dans la ScS. Nous confirmons le rôle pro fibrosant de l’IL-4. Nous montrons également que les lymphocytes TFH et TPH favorisent l’expression par les fibroblastes de gènes tels que l’IL-6 ou encore BAFF.

Conclusion

Les lymphocytes TFH et TPH pourraient participer à la fibrogenèse notamment via la secrétion de cytokines et représentent une cible thérapeutique intéressante dans la ScS.