Étude du modèle de granulomatose pulmonaire induit chez la souris Apoe-/− par un régime riche en graisse avec cholate

Abstract

Introduction

La sarcoïdose est une granulomatose systémique rare de cause inconnue, touchant préférentiellement le poumon avec une possible évolution fibrosante. Plusieurs études suggèrent une association entre sarcoïdose et obésité. L’obésité favorise la sécrétion dérégulée de facteurs pro-inflammatoires (TNFa, MCP1). Le tissu adipeux du sujet obèse est hypoxique, induisant une stabilisation de HIF et une évolution vers la fibrose. Dans une étude utilisant un modèle murin délété pour le gène apoliprotéine E (Apoe^-/−), un régime riche en graisse avec cholate entraînait une granulomatose pulmonaire et systémique [1]. Notre hypothèse est qu’un régime riche en graisse induit une inflammation systémique favorisant l’apparition de granulomes et leur évolution hypoxique notamment via HIF.

Méthodes

Des souris C57Bl/6 J sauvages (WT) ou Apoe^-/− ont reçu soit un régime riche en graisse avec cholate (CHFD) soit un régime standard (RS) pendant 8 semaines. Des études histologiques et morphométriques sur des coupes pulmonaires et hépatiques ont évalué la présence de granulome et identifié les cellules inflammatoires recrutées. Les cytokines et chimiokines impliquées dans l’inflammation pulmonaire et systémique ont été analysées par RT-qPCR et multiplex sur homogénats pulmonaires, hépatiques et sérum. La présence de zones hypoxiques a été détectée par Hypoxyprobe™.

Résultats

Sous régime CHFD les souris Apoe^-/− ne prennent pas de poids contrairement aux WT et développent des granulomes pulmonaires (p < 0,05) et hépatiques. Un recrutement de macrophages et lymphocytes T CD₄est observé au sein du parenchyme pulmonaire des souris Apoe^-/− (p < 0,05), plus important que les WT en CHFD, sans alvéolite associée. Le régime CHFD chez les souris Apoe^-/− augmente l’expression pulmonaire de gènes pro-inflammatoires de profil Th1 (Tnfa, Ifng, Il1b, Cxcl9, Il12), mais pas Th2 (Il4), ainsi que la synthèse pulmonaire et systémique de cytokines Th1 (MCP1, TNFa, IL6, IL1b). L’effet pro-inflammatoire du régime CHFD est partiellement présent chez les souris WT. Le génotype Apoe^-/− diminue l’expression pulmonaire de gènes à activité anti-inflammatoire (Il10, Pparg) et diminue la synthèse pulmonaire de leptine en CHFD. Enfin, les macrophages présents dans les granulomes sont en situation hypoxique.

Conclusion

Le régime CHFD induit un état pro-inflammatoire provoquant chez la souris Apoe^-/− la synthèse pulmonaire et systémique d’adipokines et de cytokines Th1 nécessaires à l’apparition de granulomes pulmonaires et hépatiques. Ces granulomes sont hypoxiques. Du fait de l’association entre sarcoïdose, obésité et syndrome d’apnée du sommeil, un complément d’étude sur l’effet additif de l’hypoxie intermittente sur l’évolution du granulome et la fibrose pulmonaire sera réalisé.