Análise de DNA irradiado com baixas doses de Raios X por microscopia de força atômica

Abstract

A capacidade dos raios X provocarem danos de diferentes níveis à molécula de DNA têm recebido atenção especial nos últimos anos. No entanto, ainda são poucos os estudos que tratam da interação do DNA in vitro com baixas doses dessa radiação e, majoritariamente, utilizam técnicas de caracterização qualitativas ou de baixa precisão, como a eletroforese. No presente estudo, utilizamos Microscopia Força Atômica (AFM) para analisar direta e individualmente o DNA (da glândula Timo de bovinos) irradiado com baixas doses de raios X (entre 0,4 e 1,16 Gy), aproveitando o poder de resolução e confiabilidade desta técnica. Para isso, foi desenvolvido uma metodologia experimental para irradiação de amostras de DNA com um aparelho de raios X médico, além da otimização no preparo das amostras para a obtenção de imagens por AFM. Os resultados, aqui apresentados, são relevantes pois, a partir das imagens inéditas obtidas nesse intervalo de dose, constata-se que uma radiação de baixo LET (Transferência Linear de Energia) e em baixas dosagens é capaz de gerar danos por quebras duplas e/ou múltiplas na cadeia de DNA. Nossas análises sugerem que existe uma dependência entre o aumento da dose utilizada e o aumento do número total de fragmentos resultantes, quando comparadas a amostras não irradiadas.