Identificación molecular de microorganismos en cultivos agrícolas, ornamentales y forestales en Costa Rica, 2009-2018. Parte 2

Mónica Blanco-Meneses
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Abstract

Introducción. La identificación y detección de microorganismos a partir de técnicas moleculares se ha convertido en un insumo de gran ayuda para el diagnóstico de enfermedades, y de microorganismos presentes en los cultivos. Organismos patogénicos, no patogénicos, controladores biológicos y microorganismos utilizados como competidores, antagonistas o mutualistas  pueden aislarse de cultivos agrícolas, ornamentales y forestales. Objetivo. Identificar a nivel taxonómico mediante técnicas moleculares, bacterias y levaduras patogénicas y no patogénicas en cultivos agrícolas, ornamentales y forestales de Costa Rica, y conservar el material en un banco de muestras de ADN. Materiales y métodos. Entre los años 2009 y 2018 el Laboratorio de Técnicas Moleculares del Centro de Investigación en Protección de Cultivos de la Universidad de Costa Rica recibió un total de 181 aislamientos de bacterias y levaduras para detección por medio de PCR tiempo final y tiempo real; e identificación por medio de la secuenciación de regiones específicas. Resultados. Del total de muestras el 94,2 % se analizó por medio de secuenciación y el 5,8 % por PCR. Por medio de detección por PCR en el cultivo de arroz se identificaron bacterias como Burkholderia spp., Acidovorax avenae y Pseudomonas fuscovaginae. Por medio de la secuenciación de la región parcial de 16S se identificaron 172 muestras de especies de bacterias, y cinco muestras de especies de levaduras con la región ITS del ARN ribosomal 18S. Se identificaron microorganismos aislados a partir de dieciocho especies de plantas agrícolas, ornamentales y forestales; entre estos Pseudomonas, Bacillus y Enterobacter y en el caso de levaduras Candida, Pichia y Wickerthamomyces. Conclusión. Esta investigación permitió identificar a nivel taxonómico bacterias y levaduras provenientes de cultivos de Costa Rica. Además, se desarrolla un insumo de consulta y la posibilidad de utilizar a futuro los microorganismos que se encuentran conservados dentro de un banco de muestras de ADN.
2009-2018 年哥斯达黎加农业、观赏和林业作物中微生物的分子鉴定。第二部分
导言。利用分子技术鉴定和检测微生物已成为诊断作物中存在的疾病和微生物的非常有用的工具。可以从农作物、观赏作物和林木中分离出病原菌、非病原菌、生物控制菌以及作为竞争者、拮抗剂或互助者的微生物。目标。通过分子技术,在分类学水平上鉴定哥斯达黎加农作物、观赏作物和林木中的致病性和非致病性细菌和酵母菌,并将材料保存在 DNA 样本库中。材料和方法。2009 年至 2018 年期间,哥斯达黎加大学作物保护研究中心分子技术实验室共收到 181 份细菌和酵母分离物,通过末端时间和实时 PCR 进行检测,并通过特定区域的测序进行鉴定。检测结果。在所有样本中,94.2% 通过测序分析,5.8% 通过 PCR 分析。通过在水稻培养物中进行 PCR 检测,确定了伯克霍尔德氏菌属、Acidovorax avenae 和 Pseudomonas fuscovaginae 等细菌。通过对 16S 部分区域进行测序,确定了 172 个细菌物种样本和 5 个酵母物种样本的 18S 核糖体 RNA 的 ITS 区域。从 18 种农业、观赏和林业植物中分离出的微生物得到了鉴定,其中包括假单胞菌、芽孢杆菌和肠杆菌,而酵母菌则包括念珠菌、毕赤菌和威克萨摩霉菌。结论这项研究对哥斯达黎加培养物中的细菌和酵母菌进行了分类鉴定。此外,这项研究还为今后使用保存在 DNA 样本库中的微生物提供了咨询和可能性。
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