Détermination d’un seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem

IF 1.8 Q4 TOXICOLOGY
Marc Augsburger , Laure Foit , Aurélien Thomas
{"title":"Détermination d’un seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem","authors":"Marc Augsburger ,&nbsp;Laure Foit ,&nbsp;Aurélien Thomas","doi":"10.1016/j.toxac.2024.03.084","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"<div><h3>Objectifs</h3><p>Du fait d’une relative faible marge thérapeutique, le GHB représente un risque d’intoxication ou de décès important, en particulier dans des situations de chemsex ou de soumission chimique. Afin de pouvoir dépister rapidement la consommation de GHB dans l’urine, des tests enzymatiques de dépistage rapide sont disponibles pour les échantillons prélevés chez des personnes vivantes. Comme la concentration de GHB peut augmenter après le décès, les valeurs des concentrations pour l’interprétation des résultats ou pour des seuils de détection pour des tests de dépistage doivent être adaptées pour les cas post-mortem, par rapport aux cas de personnes vivantes. L’objectif de ce travail est de déterminer un seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem.</p></div><div><h3>Méthode</h3><p>Les échantillons de sang périphérique post-mortem, prélevés sur tube fluorure-EDTA (S-Monovette®, Sarstedt, Allemagne), et d’urine post-mortem, prélevés sur tube sec (Monovette®, Sarstedt, Allemagne), de 79 cas d’autopsie documentés ont été analysés. Une analyse quantitative du GHB par CPG-SM (5973 ou 5977, Agilent, Etats-Unis) a été effectuée pour les échantillons de sang et d’urine (limite de détection : 0,5<!--> <!-->mg/L, limite inférieure de quantification : 1<!--> <!-->mg/L), et un test de dépistage du GHB (GHB Enzymatic Assay, Bühlmann, Suisse) a été réalisé sur les échantillons d’urine à l’aide d’un automate (AU480, Beckman Coulter, États-Unis). La sensibilité (SE), la spécificité (SP), la valeur prédictive positive (VPP), et la valeur prédictive négative (VPN) ont été optimisées par comparaison avec les résultats des analyses obtenus par CPG-SM dans l’urine et le sang.</p></div><div><h3>Résultats</h3><p>Parmi les cas inclus dans l’étude, 6 cas concernent des décès ayant comme cause une intoxication impliquant une prise de GHB. Dans ces cas, les concentrations sanguines et urinaires se situaient toutes au-dessus de 50<!--> <!-->mg/L (sang : 59–890<!--> <!-->mg/L ; urine : 130–10 000<!--> <!-->mg/L), alors que pour les 73 autres cas, dont la cause de décès et la documentation permet d’exclure raisonnablement la prise de GHB avant le décès, les concentrations sanguines et urinaires se situaient toutes au-dessous de 50<!--> <!-->mg/L (sang : 0–28<!--> <!-->mg/L ; urine : 0–37<!--> <!-->mg/L). En appliquant le seuil de 15<!--> <!-->mg équivalents GHB/L, utilisé pour les échantillons provenant de personnes vivantes, aux échantillons post-mortem, la SE, la SP, la VPP et la VPN du test sont respectivement de 100, 63, 18, et 100 %. Ce seuil impliquant trop de cas de type « faux positif » (27 cas sur 33), un meilleur seuil a été recherché, afin de minimiser les résultats « faux positif ». Pour un seuil de 230<!--> <!-->mg équivalents GHB/L (valeur limite supérieure de la linéarité du test de dépistage), on obtient les valeurs de 83, 96, 63 et 99 %, respectivement, ce qui est nettement plus acceptable, car le nombre de cas « faux positif » est de 2 sur 8. En revanche, on observe à ce seuil 1 cas de type « faux négatif ». À partir d’une valeur de 500<!--> <!-->mg équivalents GHB/L, on observe une SP de 100 %, avec une SE de 83 %, alors que jusqu’à une valeur de 100<!--> <!-->mg équivalents GHB/L, on observe une SE de 100 %, avec une SP inférieure à 82 %.</p></div><div><h3>Conclusion</h3><p>La valeur optimale pour le seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem se situe entre 100 et 500<!--> <!-->mg équivalents GHB/L, selon qu’on privilégie la sensibilité ou la spécificité. Une valeur de 230<!--> <!-->mg équivalents GHB/L constitue un compromis acceptable pour une application systématique du test dans la routine des cas post-mortem.</p></div>","PeriodicalId":23170,"journal":{"name":"Toxicologie Analytique et Clinique","volume":"36 2","pages":"Page S55"},"PeriodicalIF":1.8000,"publicationDate":"2024-05-16","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Toxicologie Analytique et Clinique","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352007824001069","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"Q4","JCRName":"TOXICOLOGY","Score":null,"Total":0}
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Abstract

Objectifs

Du fait d’une relative faible marge thérapeutique, le GHB représente un risque d’intoxication ou de décès important, en particulier dans des situations de chemsex ou de soumission chimique. Afin de pouvoir dépister rapidement la consommation de GHB dans l’urine, des tests enzymatiques de dépistage rapide sont disponibles pour les échantillons prélevés chez des personnes vivantes. Comme la concentration de GHB peut augmenter après le décès, les valeurs des concentrations pour l’interprétation des résultats ou pour des seuils de détection pour des tests de dépistage doivent être adaptées pour les cas post-mortem, par rapport aux cas de personnes vivantes. L’objectif de ce travail est de déterminer un seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem.

Méthode

Les échantillons de sang périphérique post-mortem, prélevés sur tube fluorure-EDTA (S-Monovette®, Sarstedt, Allemagne), et d’urine post-mortem, prélevés sur tube sec (Monovette®, Sarstedt, Allemagne), de 79 cas d’autopsie documentés ont été analysés. Une analyse quantitative du GHB par CPG-SM (5973 ou 5977, Agilent, Etats-Unis) a été effectuée pour les échantillons de sang et d’urine (limite de détection : 0,5 mg/L, limite inférieure de quantification : 1 mg/L), et un test de dépistage du GHB (GHB Enzymatic Assay, Bühlmann, Suisse) a été réalisé sur les échantillons d’urine à l’aide d’un automate (AU480, Beckman Coulter, États-Unis). La sensibilité (SE), la spécificité (SP), la valeur prédictive positive (VPP), et la valeur prédictive négative (VPN) ont été optimisées par comparaison avec les résultats des analyses obtenus par CPG-SM dans l’urine et le sang.

Résultats

Parmi les cas inclus dans l’étude, 6 cas concernent des décès ayant comme cause une intoxication impliquant une prise de GHB. Dans ces cas, les concentrations sanguines et urinaires se situaient toutes au-dessus de 50 mg/L (sang : 59–890 mg/L ; urine : 130–10 000 mg/L), alors que pour les 73 autres cas, dont la cause de décès et la documentation permet d’exclure raisonnablement la prise de GHB avant le décès, les concentrations sanguines et urinaires se situaient toutes au-dessous de 50 mg/L (sang : 0–28 mg/L ; urine : 0–37 mg/L). En appliquant le seuil de 15 mg équivalents GHB/L, utilisé pour les échantillons provenant de personnes vivantes, aux échantillons post-mortem, la SE, la SP, la VPP et la VPN du test sont respectivement de 100, 63, 18, et 100 %. Ce seuil impliquant trop de cas de type « faux positif » (27 cas sur 33), un meilleur seuil a été recherché, afin de minimiser les résultats « faux positif ». Pour un seuil de 230 mg équivalents GHB/L (valeur limite supérieure de la linéarité du test de dépistage), on obtient les valeurs de 83, 96, 63 et 99 %, respectivement, ce qui est nettement plus acceptable, car le nombre de cas « faux positif » est de 2 sur 8. En revanche, on observe à ce seuil 1 cas de type « faux négatif ». À partir d’une valeur de 500 mg équivalents GHB/L, on observe une SP de 100 %, avec une SE de 83 %, alors que jusqu’à une valeur de 100 mg équivalents GHB/L, on observe une SE de 100 %, avec une SP inférieure à 82 %.

Conclusion

La valeur optimale pour le seuil de détection pour un test de dépistage urinaire du GHB pour des échantillons post-mortem se situe entre 100 et 500 mg équivalents GHB/L, selon qu’on privilégie la sensibilité ou la spécificité. Une valeur de 230 mg équivalents GHB/L constitue un compromis acceptable pour une application systématique du test dans la routine des cas post-mortem.

确定尸检样本中 GHB 尿液筛查试验的检测阈值
目标由于伽马--羟丁酸的治疗范围相对较窄,因此具有很大的中毒或死亡风险,特别是在化学性交或化学屈服的情况下。为了能够快速检测尿液中伽马--羟丁酸的摄入量,目前已有针对活人样本的快速酶筛选检测方法。由于人死后伽马--羟丁酸的浓度可能会增加,因此用于解释结果或用于筛查测试的检测阈值的浓度值必须根据死后病例与活人病例进行调整。这项工作的目的是确定死后样本尿液中 GHB 筛查试验的检测阈值。方法分析了从 79 个有记录的尸检病例中采集的外周血样本(用含氟-EDTA 管(S-Monovette®,德国 Sarstedt)采集)和死后尿液样本(用干管(Monovette®,德国 Sarstedt)采集)。使用气相色谱-质谱仪(5973 或 5977,美国安捷伦公司)对血液和尿液样本进行 GHB 定量分析(检测限:0.5 毫克/升,定量下限:1 毫克/升),并使用自动系统(AU480,美国贝克曼库尔特公司)对尿液样本进行 GHB 筛选测试(GHB 酶法测定,瑞士 Bühlmann)。通过与尿液和血液中的气相色谱-质谱(GC-MS)分析结果进行比较,对灵敏度(SE)、特异性(SP)、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)进行了优化。在这些病例中,血液和尿液的浓度均高于 50 毫克/升(血液:59-890 毫克/升;尿液:130-10,000 毫克/升),而在其他 73 例病例中,由于死因和文件证明可以合理排除死前摄入伽马--羟丁酸的可能性,因此血液和尿液的浓度均低于 50 毫克/升(血液:0-28 毫克/升;尿液:0-37 毫克/升)。将用于活人样本的 15 毫克 GHB 当量/升阈值应用于死后样本,检验的 SE、SP、PPV 和 NPV 分别为 100、63、18 和 100%。由于这个阈值涉及太多的 "假阳性 "病例(33 例中有 27 例),因此需要寻找一个更好的阈值,以尽量减少 "假阳性 "结果。当阈值为 230 毫克 GHB 当量/升(筛查测试线性度的上限)时,我们分别得到了 83%、96%、63% 和 99%的值,这是一个更容易接受的值,因为 "假阳性 "病例的数量为 8 例中的 2 例。另一方面,在这一临界值下有 1 个 "假阴性 "病例。从 500 毫克 GHB 当量/升的数值开始,我们观察到的 MS 值为 100%,SE 值为 83%,而从 100 毫克 GHB 当量/升的数值开始,我们观察到的 SE 值为 100%,MS 值低于 82%。230毫克羟丁酸(GHB)当量/升的值是可接受的折衷值,可用于尸检的常规检测。
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