KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN BIỂU HIỆN VÀ TINH CHẾ INTERLEUKIN-33 NGƯỜI DUNG HỢP VỚI SUMO TRÊN ESCHERICHIA COLI

Abstract

Đặt vấn đề: Interleukin (IL)-33 là một thành viên mới trong họ IL-1, đóng vai trò quan trọng trong các phản ứng miễn dịch ở người thông qua tương tác với thụ thể ST2. Do đó, IL-33 là một đích tác động tiềm năng để phát triển các thuốc điều trị các bệnh lý liên quan IL-33. Nhóm nghiên cứu đã thành công tạo dòng Escherichia coli mang plasmid biểu hiện IL-33 người tái tổ hợp dạng dung hợp với tag SUMO. Mục đích: khảo sát các điều kiện nuôi cấy và tinh chế IL-33 người tái tổ hợp. Phương pháp: Khảo sát các điều kiện nuôi cấy để thu protein dạng tan: môi trường (LB, TB, ZYP-5052); nhiệt độ (25°C và 37℃). Tinh chế IL-33 dạng dung hợp bằng sắc ký ái lực cố định ion kim loại (IMAC) Kết quả: Chủng E. coli BL21(DE3) tái tổ hợp có khả năng tạo SUMO-IL-33 dạng tan với hiệu suất cao trong môi trường tự cảm ứng ZYP-5052 ở 25℃. Từ 50mL dịch nuôi cấy tinh chế qua cột Ni Sepharose thu được khoảng 20 mg protein. Kết luận: Nghiên cứu đã khảo sát được các điều kiện nuôi cấy và tinh chế thích hợp để thu IL-33 tan ở dạng dung hợp với tag SUMO với hiệu suất cao.