Development of Highly Sensitive Conventional PCR for African Swine Fever Virus Diagnosis in East Nusa Tenggara (NTT) Province

Putri Pandarangga, Abigail E. Ticoalu, M. A. Gelolodo, L. R. W. Toha
{"title":"Development of Highly Sensitive Conventional PCR for African Swine Fever Virus Diagnosis in East Nusa Tenggara (NTT) Province","authors":"Putri Pandarangga, Abigail E. Ticoalu, M. A. Gelolodo, L. R. W. Toha","doi":"10.35508/jkv.v11i2.13118","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"African Swine Fever (ASF) adalah penyakit menular pada babi dengan tingkat mortalitas mencapai 100%. Pada tahun 2019, penyakit ini sebabkan wabah pada provinsi Nusa Tenggara Timur (NTT), dimana merupakan provinsi penghasil babi terbesar di Indonesia. PCR masih digunakan sebagai alat diagnosa untuk deteksi ASF virus (ASFV). Lepas dari sensitifitas dan spesifitasnya mencapai 90%, hasil dari PCR untuk mendeteksi ASGV masih memberikan false negatives pada beberapa laboratorium. Sehingga, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan PCR yang sangat sensitif untuk deteksi ASFV secara akurat di NTT. Metode penelitian dimulai dengan penentuan tipe dari sampel, primers setup, ekstraksi DNA, pencampuran master mix, proses amplifikasi, dan elektroforesis. Hasil PCR menunjukkan bahwa ASFV dideteksi pada hati, ginjal, dan limpa dari babi yang mati di Kabupaten Kupang, NTT dengan menggunakan primer : 5' CGCAGAGGTAAGCTTTCAGG 3' (forward primer) dan 5' GCCGATACCACAAGATCAGC 3' (reverse primer) dari gen p72. Panjang produk PCR mencapai 372 bp. Sehingga, hasil studi ini dapat diaplikasikan sebagai referensi bagi laboratorium di NTT dalam mendiagnosa ASF sehingga penyakit tidak menyebar dengan cepat dan menyebabkan wabah berikutnya.","PeriodicalId":349647,"journal":{"name":"JURNAL KAJIAN VETERINER","volume":"126 2","pages":""},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2024-01-03","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"JURNAL KAJIAN VETERINER","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.35508/jkv.v11i2.13118","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}
引用次数: 0

Abstract

African Swine Fever (ASF) adalah penyakit menular pada babi dengan tingkat mortalitas mencapai 100%. Pada tahun 2019, penyakit ini sebabkan wabah pada provinsi Nusa Tenggara Timur (NTT), dimana merupakan provinsi penghasil babi terbesar di Indonesia. PCR masih digunakan sebagai alat diagnosa untuk deteksi ASF virus (ASFV). Lepas dari sensitifitas dan spesifitasnya mencapai 90%, hasil dari PCR untuk mendeteksi ASGV masih memberikan false negatives pada beberapa laboratorium. Sehingga, tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengembangkan PCR yang sangat sensitif untuk deteksi ASFV secara akurat di NTT. Metode penelitian dimulai dengan penentuan tipe dari sampel, primers setup, ekstraksi DNA, pencampuran master mix, proses amplifikasi, dan elektroforesis. Hasil PCR menunjukkan bahwa ASFV dideteksi pada hati, ginjal, dan limpa dari babi yang mati di Kabupaten Kupang, NTT dengan menggunakan primer : 5' CGCAGAGGTAAGCTTTCAGG 3' (forward primer) dan 5' GCCGATACCACAAGATCAGC 3' (reverse primer) dari gen p72. Panjang produk PCR mencapai 372 bp. Sehingga, hasil studi ini dapat diaplikasikan sebagai referensi bagi laboratorium di NTT dalam mendiagnosa ASF sehingga penyakit tidak menyebar dengan cepat dan menyebabkan wabah berikutnya.
为东努沙登加拉(NTT)省非洲猪瘟病毒诊断开发高灵敏度常规 PCR 技术
非洲猪瘟(ASF)是一种猪传染病,死亡率高达 100%。2019 年,该疾病在印尼最大的生猪生产省份东努沙登加拉省(NTT)爆发。PCR 仍被用作检测 ASF 病毒(ASFV)的诊断工具。尽管 PCR 检测 ASFV 的灵敏度和特异性高达 90%,但在一些实验室中仍会出现假阴性结果。因此,本研究的目的是开发一种高灵敏度的 PCR,用于准确检测 NTT 中的 ASFV。研究方法从确定样本类型、引物设置、DNA 提取、混合母液、扩增过程和电泳开始。聚合酶链式反应结果显示,使用引物在南努沙登加拉省古邦地区的死猪肝、肾和脾中检测到了 ASFV:5' CGCAGAGGTAAGCTTTCAGG 3'(正向引物)和 5' GCCGATACCACAAGATCAGC 3'(反向引物)。PCR 产物长度达到 372 bp。因此,本研究的结果可作为 NTT 实验室诊断 ASF 的参考,以避免该疾病迅速传播并导致下一次疫情爆发。
本文章由计算机程序翻译,如有差异,请以英文原文为准。
求助全文
约1分钟内获得全文 求助全文
来源期刊
自引率
0.00%
发文量
0
×
引用
GB/T 7714-2015
复制
MLA
复制
APA
复制
导出至
BibTeX EndNote RefMan NoteFirst NoteExpress
×
提示
您的信息不完整,为了账户安全,请先补充。
现在去补充
×
提示
您因"违规操作"
具体请查看互助需知
我知道了
×
提示
确定
请完成安全验证×
copy
已复制链接
快去分享给好友吧!
我知道了
右上角分享
点击右上角分享
0
联系我们:info@booksci.cn Book学术提供免费学术资源搜索服务,方便国内外学者检索中英文文献。致力于提供最便捷和优质的服务体验。 Copyright © 2023 布克学术 All rights reserved.
京ICP备2023020795号-1
ghs 京公网安备 11010802042870号
Book学术文献互助
Book学术文献互助群
群 号:481959085
Book学术官方微信