DNA hybridization for detection of human cytomegalovirus in bronchoalveolar lavage and pharynx biopsy

Abstract

A simplified hybridization procedure was used for detection of cytomegalovirus (CMV) in human specimens. The probe was a ³²P-labelled cloned DNA fragment of CMV strain AD169. This probe did not hybridize to DNA from uninfected cells or other herpesviruses (herpes simplex virus, Epstein-Barr virus). Specific hybridization was obtained with unselected bronchoalveolar lavage specimens, but the sensitivity of the test (33%) was lower than that of culture (80%) and immunofluorescence (60%) assays which are routinely performed in our laboratory. The detection procedure was also carried out with pharynx biopsy specimens which had been kept frozen at −70°C. CMV DNA was detected in 14% of tumour specimens and only in 1.7% of control specimens (p<0.05). The indications of DNA hybridization for CMV diagnosis are discussed.

Une méthode simplifiée d'hybridation a été utilisée pour la détection du cytomégalovirus (CMV) dans les prélèvements humains. La sonde est un fragment cloné d'ADN issu de la souche AD169 du CMV et marqué par le ³²P.

Cette sonde n'a donné aucune hybridation avec l'ADN des cellules non infectées ni avec celui d'autres virus Herpes (Herpes simplex virus, virus Epstein-Barr). Une hybridation spécifique a été obtenue sur des lavages broncho-alvéolaires n'ayant fait l'objet d'aucune sélection mais la sensibilité du test (33%) est inférieure à celle de la culture virale (80%) et à celle de l'immunofluorescence (60%) qui sont pratiquées en routine dans notre laboratoire. La même technique a été appliquée à des biopsies pharyngées qui avaient été conservées congelées à −70°C. L'ADN du CMV a été détecté dans 14% des prélèvements de tumeurs et seulement dans 1,7% des prélèvements témoins (p<0.05). Les indications de l'hybridation dans le diagnostic de l'infection à CMV sont discutées.