血细胞比容水平和整合素 αⅡbβIII 功能对 vWF 介导的血小板粘附和剪切力诱导的血小板聚集的影响

摘要 目的 剪切介导的血栓形成是一种与临床相关的现象，是过度动脉血栓形成和设备诱发血栓形成的基础。众所周知，红细胞通过边缘化血小板和血管内皮生长因子，促进血管内皮生长因子多聚体的展开，并增加与血栓接触的血小板的比例，从而机械地促进生理性止血。剪切力也在这一现象中发挥作用，它增加了边缘化程度以及 vWF 和血小板经历的近壁力，从而导致展开和活化。尽管如此，红细胞在剪切力诱导的血小板聚集中的作用尚未得到充分研究，特别是血细胞比容升高的影响尚未得到证实。 方法 本文介绍了一种突然膨胀的微流控模型，该模型是研究血小板在血细胞比容为 0 至 60% 和剪切速率为 1000 至 10,000 s-1 时粘附情况的平台。骤然膨胀的几何形状模拟了机械循环支持装置的非生理性流动分离特征，以及 FDA 基准喷嘴的验证框架。制作了 PDMS 微通道，并在其表面涂上人体胶原蛋白。对血小板进行荧光标记，并在灌注实验前以不同的血细胞比容重组血液。用阻断抗体抑制选定血液样本的整合素功能，并监测灌注过程中血小板的粘附和聚集情况。 结果 在生理血细胞比容和血细胞比容升高的情况下，剪切率的增加有利于血小板的强力粘附和大聚集体的形成。剪切力诱导的血小板聚集被证明依赖于αⅡbβⅢ功能和红细胞的存在。在血细胞比容为 20%-60% 的情况下，抑制 αIIbβIII 可使血小板的整体粘附性降低 86.4%，血栓体积缩小 85.7%。20% 的血细胞比容水平不足以使血小板有效边缘化和随后的 vWF 系链化，因此，与 40% 和 60% 的血细胞比容水平相比，5000 和 10,000 s-1 的血小板粘附率明显下降。抑制αⅡbβⅢ可显著减少血栓的整体覆盖率和大聚集体的形成。用抗αⅡbβⅢ阻断抗体 A2A9 处理的单个血小板的粘附是短暂的，不会导致血栓的持续形成，因此证明了被 vWF 粘附的血小板的稳定性是αⅡbβⅢ依赖性的。 结论 本研究强调了 vWF 介导的血小板粘附的驱动因素，这些因素与剪切力诱导血栓形成的临床抑制和血小板粘附的体外试验有关。首先，提高血细胞比容可促进血小板边缘化，从而允许血小板在超生理剪切率下通过αⅡbβⅢ介导的粘附而发生剪切诱导的血小板聚集。