Riboflavin-sensitized Photoinactivation of Taka-amylase A

S. Kim
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Abstract

タカアミラーゼAはリボフラビンの光増感反応によって不活性化されるが,これはリボフラビンの3重項状態と溶存酸素との相互作用によって生起した活牲酸素によるアミノ酸残基の酸化反応に基因する. Warburg検圧計による吸収酸素量に対する不活性化および酸化アミノ酸残基の関係から,完全失活はトリプトファン,ヒスチジン,チロシン,メチオニン,シスチン残基が約70%, 45%, 20%, 4%, 17%において起る.タカアミラーゼと同じアミノ酸組成のアミノ酸水溶液では酸素吸収がアミラーゼよりはるか大であることから,高分子形成や特殊なconformation形成の効果力が光増感酸化反応の面に現われているようである.したがって酵素の変性効果やさらに酵素-基質複合体形成の効果も光増感酸化反応に変化をもたらす.リボフラビンの光増感酸化反応機構を調べるために,常磁性金属イオンの1重項←→3重項禁止遷移に対する摂動効果を酸素吸収,光不活性化,リボフラビンの螢燐光の消光の相互関連のもとで研究し,光増感反応に活性なリボフラビンの状態は3重項状態と推定した.
核黄素致敏taka -淀粉酶A的光失活
高淀粉酶A通过核黄素的光增感反应而失去活性,这是由于核黄素的三重状态与溶解氧相互作用而产生的活氧引起的氨基酸残基氧化反应。根据Warburg检压计对吸收氧气量的失活及氧化氨基酸残基的关系,完全失活的色氨酸、组氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸残基约70%、45%、20%、4%;17%。在与高淀粉酶相同氨基酸组成的氨基酸水溶液中,氧吸收比淀粉酶大得多,因此在光增感氧化反应方面表现出高分子形成和特殊的信息形成效果。因此酶的变性效果以及酶-基质复合物的形成效果也会引起光增感氧化反应的变化。为了研究核黄素的光增感氧化反应机制,顺磁性金属离子的1项→3项禁止迁在氧气吸收、光失活性化、核黄素的萤光磷光消光的相互关联的基础上研究了对移动的摄动效果,推测对光增感反应有活性的核黄素的状态是三重项状态。
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