Photoinactivation of Taka-amylase A

S. Kim
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Abstract

タカアミラーゼAは紫外線照射または生体色素リボフラビンの光増感作用によって有効な不活性化が惹起される.前者の場合には2 hit的に,後者の場合は1 hit的に不活性化が進行する.リボフラビンによる光増感不活性化反応は色素の3重項状態と基底3重項状態の溶存酸素との複合体の解離によって生じた1重項状態の反応性に富む酸素分子種によるアミラーゼの酸化反応によるものと考えられる. N-ブロムコハク酸の熱的酸化によるアミラーゼの不活性化反応におけるトリプトファン残基の酸化と,不活性化との関連性,光不活性反応におけるトリプトファンの酸化と活性との関連及びトリプトファン残基の蛍光収率の変化から,トリプトファン残基は酵素活性に重要な関係を持つものと考えられる.アミラーゼ単独系における光不活性化の作用スペクトルから,紫外線直接照射による不活性化はシスチンによって吸収される光による不活性化の相対量子収率は99.2%で,トリプトファンによって吸収される光によるものは0.8%である.シスチンは励起状態で高能率で-S-S- → -S..S-の開裂反応が起り,またトリプトファン残基は量子収率は小さいが,励起状態で電子放出によりラジカルとなり,溶媒系に放出された電子は水を還元し溶存酸素とHO2を作り,これによりトリプトファンは酸化される.これらのために不活性化が起る.チロシン残基もトリプトファン残基と同様の酸化を受けうるが,作用スペクトルからはこのための不活性の量子収率は小さいものと考えられる.
塔卡淀粉酶A的光失活
高淀粉酶A在紫外线照射或生物色素核黄素的光增感作用下发生有效的去活性化。前者的情况是2hit,后者的情况是1核黄素的光增感失活反应是由色素的三重项状态和基底三重项状态的溶解氧的复合体的解离产生的1重项状态的反应性富氧分子的淀粉酶的氧化反应。被认为是由。N-溴琥珀酸的热氧化引起的淀淀酶去活化反应中色氨酸残基的氧化与去活化的关联性,光惰性反应中色氨酸的氧化与活性的关联以及色氨酸残基的荧光收率从淀粉酶单独系统中光失活的作用光谱来看,紫外线直接照射引起的失活是由胱氨酸吸收的光引起的失活。性化的相对量子收率为99.2%,由色氨酸吸收的光收率为0.8% .胱氨酸在激发态下具有高效率-S-S-→-S..发生S-的裂开反应,并且色氨酸残基的量子收率很小,但是在激发态下释放电子变成自由基,释放到溶剂系统的电子还原水生成溶解氧和HO2,这样色氨酸就被氧化了酪氨酸残基也会受到色氨酸残基同样的氧化,但是从作用光谱来看,因此产生的惰性的量子收率很小。
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