Determinación de la estabilidad de linfocitos T con variables de tiempo y temperatura a través de citometría de flujo en el laboratorio Synlab 2021

J. Hurtado, P. Jaramillo, M. Rojas López, Gabriel jaime Tamayo Higuita, Johanna M. Vanegas
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Abstract

Introducción: la cuantificación de subconjuntos de linfocitos T se realiza de manera rutinaria en pacientes con síndrome de inmunodeficiencia adquirida (VIH) por citometría de flujo, con el fin de estadificar la infección y la respuesta a la terapia antirretroviral. Aunque algunas casas comerciales sugieren procesar las muestras en un período de 48 horas a 20-25 °C, no hay consenso acerca de las condiciones de tiempo y temperatura en las cuales no hay afectación de los linfocitos T. Materiales y métodos: se evaluaron 50 muestras de sangre total con anticoagulante EDTA, provenientes del área metropolitana de Medellín. Cada una fue expuesta bajo condiciones de temperatura y tiempo de conservación antes de su procesamiento. Los puntos de tiempo incluyeron < 12 horas (muestra inicial), 24, 48, 72, 96 y 120 horas. Y a temperatura ambiente (20-25 °C) y refrigeración (4-8°). Resultados: variables como la temperatura y el tiempo influyen en los recuentos de las diferentes subpoblaciones linfocitarias; son más críticos los efectos de la temperatura ambiente sobre el recuento y demás variables, que el paso del tiempo. La expresión CD4 fue el marcador más estable; por cada día que se evalúo se redujo 0.08 cél/μl y no fue estadísticamente significativo (IC 95%: 0.10-0.01; p = 0.104). El marcador CD45, presentó mayor reducción en el recuento absoluto. Con el paso de los días, en promedio, disminuyeron 0.53 cél/μl, dato que fue estadísticamente significativo (IC 95%: -0.97-0.09; p = 0.016). Respecto a la viabilidad evaluada en los linfocitos totales, ésta permaneció alta a temperatura de 4-8 °C durante 96 horas, con una mediana de 72.7%.  
在Synlab 2021实验室用流式细胞术测定T细胞在时间和温度变量下的稳定性
背景:在获得性免疫缺陷综合征(hiv)患者中,通过流式细胞术对T细胞亚群进行定量,以确定感染的分期和对抗逆转录病毒治疗的反应。虽然有一些商业房屋显示处理样本48小时至20-25°C,没有协商一致意见的时间和温度条件没有哭闹t淋巴细胞相关材料和方法:评估50血样完全抗凝EDTA,来自麦德林大都市地区。每个样品在加工前都暴露在温度和储存时间的条件下。时间点包括< 12小时(初始样本)、24、48、72、96和120小时。在室温(20-25°C)和冷藏(4-8°C)。结果:温度和时间等变量影响不同淋巴细胞亚群的计数;环境温度对计数和其他变量的影响比时间的流逝更为关键。CD4表达是最稳定的标记物;每评估一天,降低0.08 cel /μl,无统计学意义(95% ci: 0.10-0.01; 95% ci: 0.10-0.01)。p = 0.104)。CD45标记物的绝对计数下降更大。随着时间的推移,平均下降0.53 cel /μl,这一数据具有统计学意义(95% ci: -0.97-0.09;p = 0.016)。在总淋巴细胞中评估的生存能力在4-8℃下保持96小时,中位数为72.7%。
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