PBJ\u00A0|\u00A0湖北大学杨秋颖课题组开发基于微同源重组的植物DNA病毒侵染性克隆稳定构建系统

背景：双生病毒是一类环状单链植物DNA病毒，其侵染性克隆在农杆菌中常因病毒复制相关蛋白（Rep）的异常表达导致质粒不稳定，影响病毒研究和应用。研究目的：湖北大学杨秋颖课题组旨在解决植物DNA病毒侵染性克隆的不稳定问题，开发一种稳定的构建系统。结论：研究发现Rep蛋白在农杆菌中的表达是导致不稳定的关键，通过在其编码区插入I-SceI识别位点并利用微同源重组修复（MMEJ）机制，成功构建了稳定的侵染性克隆，该方法在侵染植物时可无缝去除插入序列，恢复病毒活性，为病毒研究和基因操作工具提供了可靠基础。