半定量精子分类优化性犯罪样本积压基因分型

Alexandra Lopes Cândido, Nígela Rodrigues Carvalho, Paulo Bomfim Chaves, Bruno Martinucci, N. Godinho, Mariana Flávia da Mota
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摘要

对性犯罪痕迹进行基因测试可以在有或没有事先通过显微镜对精子进行分析的情况下进行,显微镜可以推断样本中精子的数量。对于存在精子的样本,差异提取是细胞裂解阶段建议的方案,因为它可以从受害者细胞的DNA中分离精子细胞的DNA(侵害者的DNA),从而提高侵害者基因图谱的恢复。在这项工作中,我们分析了通过qPCR(定量PCR)定量的精子和男性DNA的半定量分类与戈亚斯州(巴西)发生的性犯罪样本的遗传图谱质量之间的关系。为此,对93份差异提取后存在精子的阴道拭子进行了分析,然后通过qPCR进行DNA定量,并对微卫星标记进行基因分型,以供法医使用。三组精子数量与分析样本中男性和女性DNA的比例(M:F)之间没有明确的关系。然而,随着精子数量的增加,男性DNA的数量有显著增加的趋势。这一结果之后,含有更多男性DNA的样本的遗传图谱的质量得到了改善。精子计数可用于在等待处理的性犯罪痕迹(积压)的大规模基因分型工作中优先分析样本。它提高了结果的可预测性和DNA测试的成功率。
本文章由计算机程序翻译,如有差异,请以英文原文为准。
Classificação semiquantitativa de espermatozoides otimiza a genotipagem de backlog de amostras de crimes sexuais
A realizacao de testes geneticos em vestigios de crimes sexuais pode ser feita com ou sem a analise previa de espermatozoides por microscopia, que permite inferir a quantidade de espermatozoides na amostra. Para amostras com presenca de espermatozoides, a extracao diferencial e o protocolo recomendado na etapa de lise celular, pois permite isolar o DNA das celulas espermaticas (DNA do agressor) do DNA das celulas da vitima, melhorando assim a recuperacao do perfil genetico do agressor. Neste trabalho analisamos a relacao entre uma classificacao semiquantitativa de espermatozoides e o DNA masculino quantificado por qPCR (PCR quantitativo) e a qualidade do perfil genetico de amostras de crimes sexuais ocorridos no Estado de Goias (Brasil). Para tanto foram analisados 93 suabes vaginais com presenca de espermatozoides apos extracao diferencial, seguida de quantificacao de DNA via qPCR e genotipagem de marcadores microssatelites de uso forense. Nao foi observada relacao clara entre os tres grupos de contagem de espermatozoides e a razao de DNA masculino e feminino (M:F) nas amostras analisadas. Contudo, constatou-se uma tendencia de aumento significativo da quantidade de DNA masculino com o aumento do numero de espermatozoides. Esse resultado foi seguido da melhora na qualidade do perfil genetico das amostras contendo mais DNA masculino. A contagem de espermatozoides pode ser usada para priorizar amostras a serem analisadas em esforcos de genotipagem em massa de vestigios de crimes sexuais que aguardam processamento ( backlog ). Ela aumenta a previsibilidade dos resultados e a taxa de sucesso do exame de DNA.
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