André Luiz da Conceição Santos, Anna Clara Accioly Ferreira, Naiza Arcângela Ribeiro de Sá, Renato Félix da Silva, Gaby Judith Quispe Palomino, Éverton Pimentel Ferreira Lopes, Jesús Cadenas, Benner Geraldo Alves, Juliana Jales de Hollanda Celestino, Ana Paula Ribeiro Rodrigues, José Ricardo de Figueiredo
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Os seguintes parâmetros foram avaliados: crescimento e morfologia folicular, produção de estradiol, maturação nuclear do oócito e expressão relativa de genes-chave relacionados a esteroidogênese (CYP19A1, CYP17 e receptor de insulina) e remodelamento da membrana basal (MMP-9 e TIMP-2). Em ambos os tratamentos, observou-se diminuição na porcentagem de folículos morfologicamente intactos com aumento concomitante nas taxas de folículos extrusos e degenerados (P < 0,05). O tratamento GDF-9 apresentou maiores taxas de folículos extrusos apenas no 6º dia de cultivo (P < 0,05). O diâmetro do folículo aumentou progressivamente ao longo do período de cultivo (P < 0,05) com diâmetros semelhantes entre os tratamentos em todos os tempos de cultivo (P > 0,05). O GDF-9 aumentou a taxa de crescimento diário do primeiro para o segundo terço de cultivo, sendo maior (P < 0,05) que o controle no segundo terço. 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摘要
摘要本研究旨在探讨GDF-9对分离山羊窦卵泡体外培养的影响。分离选取初始窦卵泡单独培养18 d,分别进行α MEM+(对照)或α-MEM+添加200 ng/mL GDF-9 (GDF-9)处理。评估以下参数:卵泡生长和形态、雌二醇的产生、卵母细胞核成熟、与类固醇生成相关的关键基因(CYP19A1、CYP17和胰岛素受体)的相对表达和基底膜重构(MMP-9和TIMP-2)。在这两种处理中,观察到形态完整的卵泡百分比下降,同时挤压和退化卵泡率增加(P < 0.05)。0 . 05)。GDF-9处理仅在培养第6天表现出较高的挤压卵泡率(P <0 . 05)。在整个培养期间,卵泡直径逐渐增大(P < 0.05)。0.05),在所有培养时间处理之间直径相似(P >0 . 05)。GDF-9提高了1 ~ 2 / 3培养的日生长率,提高了1 ~ 2 / 3培养的日生长率0.05)第二三分之一的控制。CYP19A1、CYP17、MMP-9、TIMP-2和胰岛素受体基因的卵母细胞成熟率、雌二醇水平和相对mrna表达相似(P > P > P > P > P >)0 . 05)。综上所述,本研究首次表明,在培养基中添加GDF-9可提高体外培养山羊早期窦卵泡的生长速度。
Fator de crescimento e diferenciação - 9 (GDF-9) aumenta a taxa de crescimento in vitro de folículos antrais iniciais caprinos isolados
Resumo Este estudo teve como objetivo investigar o efeito do GDF-9 durante o cultivo in vitro de folículos antrais iniciais caprinos isolados. Os folículos antrais iniciais isolados e selecionados foram cultivados individualmente por 18 dias, e os seguintes tratamentos foram testados: α MEM+ (tratamento controle) ou α-MEM+ suplementado com 200 ng/mL de GDF-9 (tratamento GDF-9). Os seguintes parâmetros foram avaliados: crescimento e morfologia folicular, produção de estradiol, maturação nuclear do oócito e expressão relativa de genes-chave relacionados a esteroidogênese (CYP19A1, CYP17 e receptor de insulina) e remodelamento da membrana basal (MMP-9 e TIMP-2). Em ambos os tratamentos, observou-se diminuição na porcentagem de folículos morfologicamente intactos com aumento concomitante nas taxas de folículos extrusos e degenerados (P < 0,05). O tratamento GDF-9 apresentou maiores taxas de folículos extrusos apenas no 6º dia de cultivo (P < 0,05). O diâmetro do folículo aumentou progressivamente ao longo do período de cultivo (P < 0,05) com diâmetros semelhantes entre os tratamentos em todos os tempos de cultivo (P > 0,05). O GDF-9 aumentou a taxa de crescimento diário do primeiro para o segundo terço de cultivo, sendo maior (P < 0,05) que o controle no segundo terço. A taxa de maturação oocitária assim como os níveis de estradiol e a expressão relativa de RNAm para os genes CYP19A1, CYP17, MMP-9, TIMP-2 e receptor de insulina foram similares entre os tratamentos (P > 0,05). Em conclusão, este estudo mostra pela primeira vez que GDF-9 adicionado a um meio de cultivo aumentou a taxa de crescimento de folículos antrais iniciais caprinos cultivados in vitro.