膜结合型heparin-binding EGF-like growth factor (proHB-EGF) の尿细管形态形成作用

Nihon Shoni Jinzobyo Gakkai Zasshi Pub Date : 1998-10-30 DOI:10.3165/JJPN.11.161

司竹村, 聡史日野, 由佳村田, 英彦柳田, 和郎八木, 強次福島, 満岡田, 吉岡加寿夫

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摘要

探讨了膜结合型heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (proHB-EGF)的肾细管形态形成作用。在胎生大鼠(16 ~ 18day)肾组织中，在输尿管芽中发现了强烈的HB-EGF蛋白，并且在mRNA水平上也发现了强烈的HB-EGF蛋白。在phorbol ester中，切断soluble form的HB-EGF后的proHB-EGF表达细胞，在无血清Plastic dish上的monolayer culture中，呈现了branching像。其机理是促进proHB-EGF的细胞运动能力;表明自身的receptor EGF receptor的upregulation和断开的proHB-EGF在细胞接触面具有局性的恢复具有重要作用。另外，在使用无血清type I collagen gel的three dimensional culture system中培养proHB-EGF表达细胞时，在管腔一侧分裂出具有microvili的apical surface，而外侧则显示出basal surface的管腔结构特有的特性。另一方面，在添加了soluble form HB-EGF的empty vector cell以及wild NRK 52e细胞的monolayer和collagen gel culture中，由于没有观察到这一系列的branching和tubulogenesis，因此proHB-EGF通过juxtacrine的细胞间结合以及与细胞外基质的相互作用提示了这是形成尿细管形态的重要因素。

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膜結合型heparin-binding EGF-like growth factor (proHB-EGF) の尿細管形態形成作用

膜結合型heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor (proHB-EGF) の尿細管形態形成作用について検討した。胎生ラット (16～18day) 腎組織では，HB-EGF蛋白は，尿管芽に強く認められ，またmRNAレベルでも強い発現を認めた。phorbol esterにて，soluble formのHB-EGFを切断した後のproHB-EGF発現細胞は，無血清のPlastic dish上のmonolayer cultureにて，branching像を呈した。その機序として，proHB-EGFの細胞運動能の促進，自身のreceptorであるEGF receptorのupregulationや切断されたproHB-EGFの細胞接触面での局性を持った回復が重要な役割を持つことが示唆された。また，無血清type I collagen gelを用いたthree dimensional culture systemでのproHB-EGF発現細胞の培養では，管腔側にmicroviliを持つapical surfaceを，外側にはbasal surfaceを示す管腔構造特有の性格を示しながら分裂した。一方，soluble formのHB-EGFを添加したempty vector cellならびにwild NRK 52E細胞のmonolayerおよびcollagen gel cultureでは，これら一連のbranchingやtubulogenesisは観察されなかったことから，proHB-EGFのjuxtacrineを介した細胞間結合ならびに細胞外基質との相互作用が，尿細管形態形成に重要な要素であることが示唆された。

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