Flow Cytometry Analysis of Pparα Receptors in Metabolic Syndrome / Studiul Receptorilor Pparα prin Metoda Citometriei în Flux în Sindromul Metabolic

Abstract Introduction. Metabolic syndrome (MS) is a cluster of distinct metabolic alterations with an increased cardiovascular risk. Peroxisome Proliferator-Activated Receptor - Alpha (PPARα), member of the nuclear receptor superfamily of transcription factors, is critically involved in the management of lipid metabolism during homeostasis or inflammatory stresses in various cell types and represents one of the therapeutic targets in MS. We analysed the PPARα expression in leukocytes of pacients with MS, in order to address PPARα involvement in these group of diseases. Material and method. Our study included 57 adult patients recruited under informed voluntary consent, investigated in order to establish whether they present MS, according to International Diabetes Federation (IDF) European guidelines and grouped in 2 lots: the MS Lot (26 patients) and control group, non-MS Lot (31 subjects). Common clinical and laboratory parameters targeted in MS evaluation were determined for all the studied cases. The expression levels of 2 molecules, PPARα and CD36 were evaluated in various circulating leukocyte populations of these patients by an optimized flow cytometry method. Statistic analysis clarifying the significance of value differences for various parameters measured was performed under SPSS and simple statistical tests (Pearson, t-Student, Chi -test). Results and discussion. The fluorescence staining for PPARα were significantly dimmer when comparing the cellular expression in eosinophils (p<0.05) of MS versus the Control group of subjects. Conclusions: Our study is the first to show that circulating eosinophils display significantly reduced PPARα protein expression in MS patients. The differences in key molecule expression in circulating leukocytes (like PPAR species, CD36, and other) might be evocatory for the endothelial dysfunction and obesity and might be of use in the therapeutic decision. Rezumat Introducere. Sindromul metabolic (SM) reprezintă o asociere de alterări metabolice independente cu risc cardiovascular crescut. Receptorii activați de inductorii proliferării peroxizomilor-alpha (PPARα), membri ai superfamiliei receptorilor nucleari cu rol de factori de transcripţie , sunt implicați în reglarea metabolismului lipidic și inflamație în diferite tipuri de celule și reprezintă una din țintele terapeutice în SM. Am analizat expresia PPARα în leucocitele pacienților cu SM, îndreptându-ne spre implicarea PPARα în această patologie. Material și metoda. Studiul s-a desfășurat pe un număr de 57 pacienți adulți recrutați după semnarea consimțământului informat, investigați pentru evidențierea SM conform criteriilor Federației Internaționale de Diabet (IDF) și care au fost grupați în două loturi: lotul SM (26 pacienți) și lotul de control, fără SM (31 subiecți). Au fost determinați parametrii clinici și de laborator utilizați curent în evaluarea SM. În populațiile de leucocite circulante ale pacienților au fost evaluate nivelurile de expresie a două molecule, PPARα și CD36, printr-o metodă optimizată de citometrie în flux . Semnificația diferențelor dintre valorile parametrilor măsurați a fost stabilită prin analiza statistică, utilizând programul SPSS și teste statistice simple (Pearson, t-Student, Chi-test). Rezultate și discuții. Când am comparat nivelul de expresie a PPARα în eozinofile, am obținut a reducere semnificativă a intensității medie de fluorescență (p<0.05) pentru PPARα în lotul MS versus lotul martor. Concluzii. Studiul nostru este primul care arată că nivelul de expresie a PPARα în eozinofile este diminuat semnificativ la pacienții cu SM. Diferențele de expresie ale acestor molecule cheie în leucocitele circulante (ca diferite specii de PPAR, CD36 și altele) ar putea deveni evocatoare pentru disfuncția endotelială și obezitate și ar putea fi utile în elaborarea unei decizii terapeutice.