基因工程与基因编辑基础:丝状真菌不同技术的系统综述

Nikael Souza de Oliveira, Fernanda Pessi de Abreu, S. D. A. E. Silva
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Resultados: Obteve-se 32 artigos, os quais descrevem 9 técnicas de edição gênica: Mutagênese Clássica; Nocaute gênico induzido por transposon (TAGK); Integração mediada por enzimas de restrição (REMI); Meganucleases; Recombinação homóloga; Nucleases efetoras do tipo ativadoras de transcrição (TALENs); Nucleases dedo de Zinco (ZFNs); Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens (ATMT); e Clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats associado a nuclease Cas9 (CRISPR/Cas9). Sendo CRISPR/Cas9 a tecnologia predominante nos trabalhos. Conclusão: Para realização da engenharia genética em um organismo, além da técnica de edição gênica é necessário a escolha de um vetor e de uma técnica de transformação, bem como conhecimento acerca do mecanismo de reparo de DNA na espécie-alvo. 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摘要

简介:基因编辑技术的出现使生物体能够以特定的方式进行修饰。因此,可以选择具有生物技术潜力的生物,并提高其酶和代谢物的产量。目的:本研究旨在列出近5年(2015-2019年)真菌基因编辑技术。方法:采用系统的文献综述。为此,采取了以下步骤:详细阐述待回答的问题;确定搜索字符串和数据库;定义纳入和排除文章的标准;选择、提取、分析和解释结果。结果:共获得32篇文章,描述了9种基因编辑技术:经典诱变法、经典诱变法、经典诱变法转座子诱导基因敲除(TAGK);限制性内切酶介导的整合;Meganucleases;同源重组;转录激活型效应核酸酶(TALENs);锌指核酸酶(ZFNs);肿瘤农杆菌(ATMT)介导的转化;与Cas9核酸酶(CRISPR/Cas9)相关的聚类、规则间隔、短回文重复。CRISPR/Cas9是这项工作的主要技术。结论:在生物体中进行基因工程,除了基因编辑技术外,还需要选择载体和转化技术,以及了解目标物种的DNA修复机制。有不同的技术,有不同的基础,使用哪种技术的选择将取决于团队的评估和研究的目标。
本文章由计算机程序翻译,如有差异,请以英文原文为准。
Fundamentos de engenharia genética e edição gênica: uma revisão sistemática sobre as diferentes técnicas utilizadas em fungos filamentosos
Introdução: O advento das tecnologias de edição gênica permitem modificar organismos de modo específico. Desta forma, pode-se selecionar um organismo com potencial biotecnológico e melhorar a produção de suas enzimas e metabólitos. Objetivo: Este trabalho tem como objetivo elencar as técnicas de edição gênica utilizadas em fungos nos últimos 5 anos (2015-2019). Metodologia: Foi empregada uma revisão sistemática da literatura. Para tal, realizou-se as seguintes etapas: Elaboração das perguntas a serem respondidas; Determinação das strings de busca e dos bancos de dados; Definição de critérios de inclusão e exclusão de artigos; Seleção, extração, análise e interpretação dos resultados. Resultados: Obteve-se 32 artigos, os quais descrevem 9 técnicas de edição gênica: Mutagênese Clássica; Nocaute gênico induzido por transposon (TAGK); Integração mediada por enzimas de restrição (REMI); Meganucleases; Recombinação homóloga; Nucleases efetoras do tipo ativadoras de transcrição (TALENs); Nucleases dedo de Zinco (ZFNs); Transformação mediada por Agrobacterium tumefaciens (ATMT); e Clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats associado a nuclease Cas9 (CRISPR/Cas9). Sendo CRISPR/Cas9 a tecnologia predominante nos trabalhos. Conclusão: Para realização da engenharia genética em um organismo, além da técnica de edição gênica é necessário a escolha de um vetor e de uma técnica de transformação, bem como conhecimento acerca do mecanismo de reparo de DNA na espécie-alvo. Existem diferentes tecnologias, com diferentes fundamentos, a escolha de qual técnica utilizar dependerá da avaliação da equipe e do objetivo da pesquisa.
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