3比较DNA提取方法从所有。细胞放大基因片段Β人间-GLOBINA PCR

Brenda Gisela Martinez Oliva, Ricardo Enrique Grados Torrez
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摘要

本研究比较了酚醛-氯仿-异戊醇、冷冻/解冻和柱状ReliaPrep血液gDNA Miniprep系统三种DNA提取方法。为提取DNA样本被集中和稀释(1/10)由涂片扫描采集的细胞是所有。玻利维亚的科恰班巴—女proce事故系数,利用DNA提取质量指标的放大为PCR片段268 pb相应基因编码区的β-globina。分析员工cebadores序列在PCR (GH20 forward和PC04 reverse)表明GH20 (F)有能力dimerizar用一个构象,而PC04 (R)能dimerizar 5不同结构,然而,这些cebadores建议使用,因为所有这些dímeros∆G不构成能源良好,能够正确的放大。本条报导成功提取DNA样本稀释和集中起细胞所有。使用方法冻结/解冻方法与列Relia -届会议。然而,与方法fenol-cloroformo-alcohol isoamílico未采集接收DNA.Fecha提取的结果:23/04/2020¦¦核准日期:24/07/2020
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COMPARACIÓN DE 3 MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE DNA A PARTIR DE CÉLULAS CERVICALES PARA LA AMPLIFICACIÓN DE UN FRAGMENTO DEL GEN Β-GLOBINA HUMANA POR PCR
En este trabajo se compararon 3 métodos de extracción de DNA: Fenol-cloroformo-alcohol isoamílico, Congelación/descongelación y Column ReliaPrep Blood gDNA Miniprep System. Para la extracción de DNA se emplearon muestras concentradas y diluidas (1/10) de células cervicales obtenidas por barrido cervical de mujeres proce- dentes de Cochabamba – Bolivia, utilizando como indicador de calidad de extracción de DNA a la amplificación por PCR del fragmento de 268 pb correspondiente a una región del gen β-globina. El análisis de la secuencia de cebadores empleados en PCR (GH20 forward y PC04 reverse) reveló que GH20(F) tiene la capacidad de dimerizar con una sola conformación, mientras que PC04(R) podría dimerizar con 5 conformaciones diferentes, sin embargo, se recomienda el uso de estos cebadores puesto que el ∆G de todas estos dímeros no representa una energía favorable, permitiendo una correcta amplificación. El presente artículo reporta la extracción exitosa de DNA a partir de muestras diluidas y concentradas de células cervicales empleando el método de congelación/descongelación y el método con Columna Relia - Prep. Sin embargo, con el método de fenol-cloroformo-alcohol isoamílico no se obtuvieron resultados de extracción de DNA.Fecha de recepción: 23/04/2020   ¦¦   Fecha de aprobación: 24/07/2020
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