Technique d'extraction de 12 benzodiazépines dans le plasma. Résultats expérimentaux multicentriques

Dans le cadre des differents themes de travail proposes aux membres de la commission de Toxicologie Clinique de la SFTA, une etude est realisee sur l'identification et la quantification simultanee de 12 benzodiazepines dans le plasma. L'objectif est de tester la robustesse d'une technique d'extraction en l'imposant aux differents participants, les conditions chromatographiques de separation et le mode de detection restant libres, fonctions de l'equipement de chaque laboratoire. L'etude a ete realisee sur une periode de 2 mois et demi. Deux echantillons tests de plasmas surcharges avec 12 benzodiazepines a des concentrations therapeutiques ou supra-therapeutiques sont adresses a chaque centre d'investigation en vue de leur evaluation. La technique d'extraction utilise un melange d'hexane / dichloromethane en milieu tamponne (pH 9.2) et le loflazepate d'ethyle comme standard interne. Une methode CLHP avec detecteur a barrette de diode est proposee a defaut par le laboratoire coordonnateur aux participants ne disposant pas de technique d'analyse. Sur les 11 participants, 10 utilisent une technique CLHP, un seul une technique CPG. Parmi les techniques CLHP, 2 d'entre elles associent un detecteur de masse, 7 un detecteur a barrette de diodes, 1 un detecteur UV. La technique CPG est associee a un detecteur de masse. L'analyse des resultats montre que la technique d'extraction proposee a ete testee avec succes par 8/11 des participants : 4/11 laboratoires sans erreur et 4/11 laboratoires avec 1 ou 2 resultats exclus. Par contre, 3/11 laboratoires ont rencontre des difficultes majeures : un site par la survenue d'emulsions lors du traitement des echantillons tests (plasmas lyophilises a reconstituer), un site par manque de temps et d'experience, le troisieme mettant en cause le choix du standard interne en technique CPG, le loflazepate d'ethyle n'ayant pas fait l'objet d'une etude prealable par cette technique.