Jörg-Hermann Ozegowski , Heide Knöll, Dieter Gerlach, Werner Köhler
{"title":"Isolierung und Charakterisierung von erythrogenen Toxinen VIL Untersuchung des von Streptococcus pyogenes gebildeten erythrogenen Toxins Typ C","authors":"Jörg-Hermann Ozegowski , Heide Knöll, Dieter Gerlach, Werner Köhler","doi":"10.1016/S0174-3031(84)80041-4","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"<div><p>Erythrogenic toxin (ET) type C was purified from culture filtrates of <em>Streptococcus pyogenes</em> strains NY 5, T 18, and AT 13. Methods used included ammonium sulfate precipitation, phosphate precipitation, column chromatography on CM-Sepharose and Sephadex G 100, and isoelectric focusing in Sephadex gel. The molecular weight was determined by SDS gel electrophoresis as 25,500. The preparation reacted only with homologous antiserum (anti-C), but not with antitoxins types A or B in double diffusion tests. The isoelectric point was determined to be 6.8 by analytical isoelectric focusing. Also the amino acid composition was determined. The toxin was found to be mitogenic (as well as pyrogenic and toxic for rabbits). The ET type C is digested by trypsin, pepsin, chymotrypsin and Pronase E, but is rather stable when treated with papain or streptococcal proteinase.</p></div><div><p>Aus Kulturfiltraten der <em>Streptococcus pyogenes</em>-Stämme NY 5, T 18 und AT 13 wurde nach Ammoniumsulfatfällung, Phosphatfällung, CM-Sepharosechromatografie mit anschließender</p><p>Fokussierung und Chromatografie an Sephadex G 100 erythrogenes Toxin Typ C dargestellt. Das Molekulargewicht des Toxins wurde durch SDS-Elektrophorese zu 25500 bestimmt. Serologisch reagierte das Toxin nur mit dem homologen Anti-C-Toxin. Mit isoelektrischer Fokussierung wurde ein isoelektrischer Punkt von 6,8 bestimmt. Die Aminosäurezusammensetzung wurde bestimmt und mit Literaturwerten verglichen. Die Substanz war mitogen, pyrogen und toxisch für Kaninchen. Das Toxin wird durch Trypsin, Pepsin, Chymotrypsin und Pronase E abgebaut, die Behandlung mit Papain und Streptokokkenproteinase führt lediglich zu einem Verlust der Pyrogenität.</p></div>","PeriodicalId":79282,"journal":{"name":"Zentralblatt fur Bakteriologie, Mikrobiologie und Hygiene. 1. Abt. Originale A, Medizinische Mikrobiologie, Infektionskrankheiten und Parasitologie = International journal of microbiology and hygiene. A, Medical microbiology, infectious...","volume":"257 1","pages":"Pages 38-50"},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"1984-05-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"https://sci-hub-pdf.com/10.1016/S0174-3031(84)80041-4","citationCount":"6","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Zentralblatt fur Bakteriologie, Mikrobiologie und Hygiene. 1. Abt. Originale A, Medizinische Mikrobiologie, Infektionskrankheiten und Parasitologie = International journal of microbiology and hygiene. A, Medical microbiology, infectious...","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0174303184800414","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}
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Abstract
Erythrogenic toxin (ET) type C was purified from culture filtrates of Streptococcus pyogenes strains NY 5, T 18, and AT 13. Methods used included ammonium sulfate precipitation, phosphate precipitation, column chromatography on CM-Sepharose and Sephadex G 100, and isoelectric focusing in Sephadex gel. The molecular weight was determined by SDS gel electrophoresis as 25,500. The preparation reacted only with homologous antiserum (anti-C), but not with antitoxins types A or B in double diffusion tests. The isoelectric point was determined to be 6.8 by analytical isoelectric focusing. Also the amino acid composition was determined. The toxin was found to be mitogenic (as well as pyrogenic and toxic for rabbits). The ET type C is digested by trypsin, pepsin, chymotrypsin and Pronase E, but is rather stable when treated with papain or streptococcal proteinase.
Aus Kulturfiltraten der Streptococcus pyogenes-Stämme NY 5, T 18 und AT 13 wurde nach Ammoniumsulfatfällung, Phosphatfällung, CM-Sepharosechromatografie mit anschließender
Fokussierung und Chromatografie an Sephadex G 100 erythrogenes Toxin Typ C dargestellt. Das Molekulargewicht des Toxins wurde durch SDS-Elektrophorese zu 25500 bestimmt. Serologisch reagierte das Toxin nur mit dem homologen Anti-C-Toxin. Mit isoelektrischer Fokussierung wurde ein isoelektrischer Punkt von 6,8 bestimmt. Die Aminosäurezusammensetzung wurde bestimmt und mit Literaturwerten verglichen. Die Substanz war mitogen, pyrogen und toxisch für Kaninchen. Das Toxin wird durch Trypsin, Pepsin, Chymotrypsin und Pronase E abgebaut, die Behandlung mit Papain und Streptokokkenproteinase führt lediglich zu einem Verlust der Pyrogenität.
从化脓性链球菌菌株ny5、t18和at13的培养滤液中纯化出C型红原毒素(ET)。方法包括硫酸铵沉淀法、磷酸盐沉淀法、CM-Sepharose和Sephadex g100柱层析法、Sephadex凝胶等电聚焦法。SDS凝胶电泳测定分子量为25,500。在双重扩散试验中,该制剂仅与同源抗血清(抗- c)反应,而与A型或B型抗毒素不反应。通过分析等电聚焦确定等电点为6.8。测定了氨基酸组成。该毒素被发现是有丝分裂的(以及对兔子的热原和毒性)。ET C型可被胰蛋白酶、胃蛋白酶、凝乳胰蛋白酶和蛋白酶E消化,但在木瓜蛋白酶或链球菌蛋白酶处理下相当稳定。【关键词】链球菌培养滤液pyogenes-Stämme ny5, t18和at13 wurde nach Ammoniumsulfatfällung, Phosphatfällung, cm - sepharosecchromatography mit anschließenderFokussierung und chromatography and sehadex g100 red Toxin C型dargestellt。sds - elektrophrese z25500的分子量测定。血清学检测结果显示,抗c -毒素与抗c -毒素是同源的。[6][8][估计][j]。Die Aminosäurezusammensetzung wurde bestestimmt and mit Literaturwerten verglichen。Die Substanz war有丝分裂原,热原和毒性[r] Kaninchen。胰蛋白酶,胃蛋白酶,胰凝乳蛋白酶和蛋白酶E - abgebaut,胰蛋白酶和链状蛋白蛋白酶[j]。