Genotyping of Heterogenous Osteopetrotic Mice Using Microsatellite Markers

Abstract

The aim of this study was to elucidate the three genotypes (op/op, op/+ and +/+) of heterogenous osteopetrotic mice using microsatellite markers. The genotyping analysis was performed on genetic crosses using B6C3Fe-op/+ and A/WySnJ mice. In this study, we used five MIT markers, D3Mit11, 75, 101, 102 and 189 that are closely linked to the op locus and which segregate polymorphic variants in mating between B6C3Fe-op/+ and A/WySnJ mice, and the homozygous op/op F3 mice were obtained by F2 mice mating. From the results of F3 genotyping, it was possible to determine the genotype of the op gene without a complicated molecular process. Histopathological studies revealed that the F3-op/op mice showed similar femur bone structures to those of B6C3Fe-op/op mice. Based on these findings, it is suggested that genotyping of heterogenous osteopetrotic mice using microsatellite markers is a powerful technique for investigating the mechanism of osteoclast development and genetic studies of osteopetrosis. 抄録:大 理石 骨病 交雑系 モ デルマ ウス を用 い,マ イク ロサ テ ライ トマー カー によ る遺伝子 型 を検 出 す るこ とで op遺 伝子 の3つ の遺 伝子型(op/op, op/+, +/+)を 判定 で きるか否 か を 目的 と し本実験 を行 った。B6C3Feop/+マ ウス とA/WySnJマ ウ ス との交配 よ り得 られ た すべ て のF2マ ウス の遺 伝 子型 をマ イ ク ロサ テ ライ ト マー カー にて判 定 した と ころ,す べて のマ ウスで表現型(切 歯 の萌 出の有無)と 一 致 していた。 さらに,肉 眼 的 に は+/+と 判別 困難 なヘ テ ロ型(op/+)マ ウス をマイ クロサ テライ トマー カー よ り判定 し,選 抜 したF2ヘ テ ロ 型 マ ウス雌雄 を交 配 した ところ,F3マ ウス においてop/opマ ウスを作 成す るこ とがで きた。また,組 織 学的所 見 よ り従 来 のopマ ウス とF3-op/opマ ウスで は大 腿骨 にお ける形 態学 的特徴 が類似 して いた。以 上 の結果 よ り,大 理 石骨病 交雑 系 モデル マ ウスはマ イ クロサテ ライ トマーカー を用 いる こ とで簡 便 に遺 伝子 型 を判 定で きる ことが 明 らか とな り,破 骨 細胞 の分化 に対 す るメ カニ ズム解明 な らび に大理 石骨病 の遺伝 学的研 究 に有 用で あ る ことが