Cotton gauze bandage: a support for protease immobilization for use in biomedical applications

Abstract

Neste trabalho foi efetuada a imobilizacao de tripsina numa gaze esterilizada de algodao. Foram determinadas as condicoes otimas de imobilizacao: foi estudada a influencia do pH, concentracao e volume da solucao de tripsina usada na imobilizacao na hidrolise da N-benzoil-DL-arginina p-nitroanilida. As propriedades cataliticas, os parâmetros cineticos e as condicoes de estabilidade das enzimas livre e imobilizada foram comparadas. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura otimos para a tripsina imobilizada foram 9.5 e 55 oC, respectivamente, maiores que os correspondentes da forma livre (7,5 e 45 oC). A 37 oC e a pH 7,0 (aproximadamente as condicoes fisiologicas) Km (constante de Michaelis) foi 3,98 µmol/mL e Vmax (velocidade maxima de reaccao) foi 0,719 µmol/(min mg) para a tripsina imobilizada; para a tripsina livre os valores correspondentes foram 2,46 µmol/mL e 2,89 µmol/(min mg). A quantidade de enzima imobilizada foi de 6 mg/g (base seca). Apos 30 dias nao se verificou libertacao de tripsina do suporte. O bom desempenho da tripsina imobilizada na gaze esterilizada de algodao comprova a sua potencial utilizacao como agente anti-inflamatorio no tratamento de lesoes cutâneas.