Solid Phase Extraction of Bryophyte Lipids / Briofītu lipīdu cietfāzes ekstrakcijas frakcionēšana

Abstract

Abstract A simple, fast and reproducible analytical method for fractionation of freely available bryophyte lipids was developed. Lipid fractionation was achieved by solid phase extraction using porous silica and silica derivatized with -NH2 groups and the compounds were quantified as their trimethylsilyl derivatives by gas chromatography-mass spectrometry. The suggested fractionation method allows to identify several groups of substances prospective in respect of search of new biologically active compounds in bryophytes as well as in respect of understanding of their metabolism. Pētījuma ietvaros izstrādāta vienkārša, ātra un viegli atkārtojama analītiska metode briofītu lipīdu frakcionēšanai. Lipīdu frakcijas frakcionēšanai izmantoja cietfāzes ekstrakciju ar silikagēlu un ar NH2 grupām modificētu silikagēlu, iegūtās vielu grupas kvantificēja kā to trimetilsilil atvasinājumus, izmantojot gāzes hromatogrāfiju-masas spektrometriju. Frakcionēšanu veica, izmantojot eluentu polaritātes gradienta principu (eluenti: heksāns, heksāns/hloroforms 5:1, hloroforms), kā pēdējo eluentu ar NH2 grupām modificēta silikagēla gadījumā izmantojot skābes (etiķskābes) šķīdumu. Izpētes objekti bija divi Latvijā plaši izplatīti sūnaugi (Polytrichum commune, Dicranum polysetum), kuru sastāvā identificēja vairāk nekā 45 dažādus savienojumus, daudzi no kuriem ir ar augstu bioloģisko aktivitāti. Sūnaugu sastāvā identificēja sterolus, tokoferolus, taukskābes un citi savienojumus. Izmantotā frakcionēšanas shēma pavēra iespējas identificēt daudzus savienojumus, kuri kopējā ekstrakta hromatogrammā nebija uzrādīti, piemēram, alkānu rindas savienojumi, vairāki steroli. Līdz ar to sūnaugu lipīdu cietfāzes frakcionēšanas metode ļāva noteikt vielu klātbūtni, kuras atrodas mikrodaudzumos, bet kuras varēja ļaut izsekot brīofītu pārvērtībām bioģeoķīmiskos procesos. Ieteiktā frakcionēšanas metode ļāva arī identificēt vairākas vielu grupas, kuras varētu būt perspektīvas kā jaunas bioloģiski aktīvas vielas, kā arī palīdzēja labāk izprast briofītu metabolismu, piemēram starpsugu atšķirības un sastāva sezonālās mainības raksturu.