Application of a real-time PCR assay to detect BK potassium channel expression in samples from Atlantic salmon (Salmo salar) and Rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) acclimated to freshwater#

Abstract

El salmon del Atlantico (Salmo salar) y la trucha arcoiris (Oncorhynchus Mykiss) son especies que se reproducen en agua dulce y durante la smoltificacion deben aclimatarse para vivir en agua de mar, gracias a la secrecion del exceso de NaCl al ambiente. La industria salmonera utiliza la medicion de la actividad de la Na+/K+ ATPasa como marcador molecular para determinar el tiempo de transferencia de los smolts al mar. Sin embargo, la baja precision de este marcador es un importante problema en la industria. Como el mecanismo molecular de secrecion de NaCl en las branquias en peces aclimatados al mar tiene el requisito termodinamico de reciclar el K+ fuera de las celulas por medio de canales de potasio, nosotros hipotetizamos que canales de potasio expresados en branquias podrian ser candidatos a potenciales nuevos marcadores para monitorear el proceso de smoltificacion. En este trabajo se utilizo la tecnica de PCR en tiempo real para medir la expresion de ARNm del canal de potasio BK. Se encontro expresion en branquias, rinon e intestino en animales aclimatados a agua dulce, asi como tambien se encontro, de forma interesante, un aumento de la expresion del canal de potasio BK al aumentar la salinidad al dia 7 especificamente en branquia. El producto amplificado por PCR en tiempo real es unico y su secuencia posee un 98% de identidad con la porcion del canal BK descrito en la base de datos del NCBI. Este ensayo de PCR en tiempo real podria ayudar al monitoreo de los cambios de expresion del canal de potasio BK durante la smoltificacion para estudiar si es posible usar este canal como marcador molecular en el futuro.