Patrones de expresiòn del gen Hey1 durante el desarrollo de arcos branquiales y prominencias faciales

Pub Date : 2018-09-01 DOI:10.21897/rmvz.1370
Belfran Carbonell M, Francy Bayona R, Zayra V Garavito-Aguilar, Carolina Parada B, Humberto Arboleda G, Clementina Infante-Contreras C
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Abstract

Objetivo. El presente estudio tuvo como objetivo describir detalladamente los patrones de expresión del gen Hey1, un efector de la vía Notch durante el desarrollo de arcos branquiales y prominencias faciales. Materiales y métodos. Se incubaron huevos fertilizados de pollo (Gallus gallus) obtenidos de una granja local entre 37.5-38.5ºC con humedad relativa del 70% hasta que los embriones alcanzaron los estadios HH14 hasta HH25 de Hamilton-Hamburger. Las sondas Hey1 marcadas con digoxigenina-UTP se generaron a partir de plásmidos linearizados con T3 polimerasa por transcripción in vitro. Luego se realizó hibridación in situ sobre embriones completos. Se obtuvieron al menos 3 repeticiones (n = 3) para cada estadio. Para confirmar los resultados observados en embriones completos, se realizaron cortes sagitales y coronales de 10 µm. Resultados. Durante los estadios de desarrollo HH14 y HH18, la expresión del gen Hey1 se localizó en el endodermo de las bolsas branquiales. La expresión génica de Hey1 también se observó en el epitelio que cubre las prominencias maxilares y mandibulares durante las etapas de desarrollo HH19 y HH21, así como en el epitelio nasal entre HH19 y HH25.  También se detectaron transcritos de Hey1 en el epitelio que cubre la prominencia frontonasal durante la etapa HH21. Conclusiones. Estos patrones de expresión sugieren la participación de este componente de la vía de señalización Notch en la morfogénesis craneofacial, posiblemente estableciendo patrones de segmentación faríngea durante las primeras etapas y / o regulando la proliferación y diferenciación celular durante las últimas etapas del desarrollo facial.
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鳃弓和面部突出发育过程中Hey1基因的表达模式
目标。我们的研究旨在详细描述Hey1基因的表达模式,Hey1基因是一种Notch通路效应因子,在鳃弓和面部突出发育过程中发挥作用。材料和方法。从当地农场获得的受精卵(Gallus Gallus)在37.5-38.5°C和70%的相对湿度下孵育,直到胚胎达到汉密尔顿-汉堡HH14 - HH25期。用T3聚合酶线性化的质粒经体外转录生成地高氧原蛋白- utp标记的Hey1探针。然后对整个胚胎进行原位杂交。每个阶段至少有3个重复(n = 3)。为了证实在整个胚胎中观察到的结果,进行了10µm的矢状和冠状切片。结果。在HH14和HH18发育阶段,Hey1基因的表达定位于鳃袋内皮。在HH19和HH21发育阶段,以及HH19和HH25之间的鼻上皮中,也观察到Hey1基因的表达。在HH21期覆盖额鼻突出的上皮中也检测到Hey1转录本。结论。这些表达模式表明Notch信号通路的这一组成部分参与了颅面形态发生,可能在早期建立咽分割模式和/或在面部发育后期调节细胞增殖和分化。
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