Evaluación y uso de un péptido sintético para la detección de anticuerpos específicos contra Plasmodium falciparum

NOVA Pub Date : 2018-09-18 DOI:10.22490/24629448.2831
S. Barrera, Adriana Cepeda Adriana Cepeda, Hernando Curtidor, Y. Silva
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Abstract

Introducción. La malaria continúa siendo una de las enfermedades que causa mayor morbimortalidada nivel mundial. Por esta razón es importante desarrollar herramientas diagnósticas eficaces que se implementen como estrategias para el control de la enfermedad. Objetivos. Estandarizar las condiciones del inmunoensayo enzimático (ELISA), para la detección de IgG específica contra Plasmodium falciparum en sueros de pacientes diagnosticados por gota gruesa con malaria no complicada por P. falciparum, empleando como antígeno un extracto proteico obtenido a partir de cultivo de P. falciparum o un péptido sintético derivado de la proteína de superficie de merozoito GLURP (del inglés: glutamate rich protein). Materiales y métodos. Para la estandarización de la técnica, se utilizaron 22 sueros de pacientes positivos para malaria por P. falciparum y 11 diagnosticados positivos para malaria por P. vivax utilizando la técnica de gota gruesa. Como controles negativos se utilizaron 44 sueros de individuos sanos. Los sueros fueronprobados contra extracto de proteínas del parásito y el péptido sintético IMT 94 derivado de la proteína GLURP, para evaluar las concentraciones y las diluciones óptimas de cada componente del sistema. Para la validación de la técnica se utilizaron 251 sueros de pacientes positivos para P. falciparum y 44 sueros de individuos sanos, diagnosticados utilizando la técnica de gota gruesa. Resultados. La técnica estandarizada con el péptido sintético permitió observar diferencia significativa en el reconocimiento de sueros de pacientes, controles positivos y negativos por los antígenos (extracto de proteínas y péptidos sintéticos). Conclusiones. La metodología usada permite identificar la respuestas inmune específica contra P. falciparum.
合成肽在检测恶性疟原虫特异性抗体中的评估和用途
介绍。疟疾仍然是全球死亡率最高的疾病之一。出于这个原因,重要的是开发有效的诊断工具,作为控制疾病的策略来实施。目标。标准化酶联免疫分析(ELISA)的条件,以检测被诊断为患有未合并疟原虫的疟疾粗滴患者血清中针对恶性疟原虫的特异性IgG。恶性疟原虫,使用从培养中获得的蛋白质提取物作为抗原。恶性疟原虫或从裂殖子表面蛋白Glurp(英文:富含谷氨酸的蛋白质)中提取的合成肽。材料和方法。为了使该技术标准化,使用了22份恶性疟原虫疟疾阳性患者的血清和11份间日疟原虫疟疾阳性患者的血清,使用了厚液滴技术。44份健康人血清作为阴性对照。血清对寄生虫的蛋白质提取物和从GLURP蛋白中提取的合成肽IMT 94进行了测试,以评估系统每个成分的最佳浓度和稀释度。该技术的验证使用了251份恶性疟原虫阳性患者的血清和44份健康个体的血清,这些血清是使用厚液滴技术诊断的。结果。使用合成肽的标准化技术可以观察到患者血清、抗原阳性和阴性对照(蛋白质和合成肽提取物)在识别方面的显著差异。结论。使用的方法可以识别针对恶性疟原虫的特定免疫反应。
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