Development, optimization and validation of an analytical method for the determination of voriconazole in plasma by high-performance liquid chromatography-ultraviolet detection: Application for comprehensive study

Abstract

Objectives

Voriconazole is a widely used antifungal agent in clinical settings. However, its use has been associated with neurological side effects in some patients. For this reason, it is crucial to monitor its plasma levels to ensure that they are within the therapeutic range. Thus, in this study, we aimed to develop a simple, fast, and efficient method for the determination of voriconazole in plasma using reversed-phase HPLC-UV. We also aimed to validate the method for its application to routine analysis of immunocompromised patients.

Material and methods

Plasma samples from immunocompromised patients were subjected to deproteinization with acetonitrile followed by centrifugation. Chromatographic separation was carried out on a C18 column with UV detection at 254 nm in isocratic mode. The concentrations were calculated by comparing peak areas to those of the internal standard, ketoconazole. The method was validated using the accuracy profile, which uses a calibration curve established for the therapeutic range of 1 to 5.5 μg/mL.

Results

The developed method was proved to be rapid by giving a short analysis time for voriconazole at around 5.5 min. Additionally, no interference with the biological matrix was detected. The obtained recoveries were higher than 90%. The accuracy profile showed that the method was accurate and precise for the determination of voriconazole in plasma.

Conclusion

The developed method was proved to be simple, efficient, that requires minimal sample preparation. Thus, it can be routinely applied for the therapeutic monitoring of voriconazole.

But/Objectif

Le voriconazole est un antifongique largement utilisé en milieu clinique. Cependant, son utilisation est associée à des effets secondaires neurologiques chez certains patients. Il est donc essentiel de surveiller les concentrations plasmatiques pour s’assurer qu’elles se situent dans la fourchette thérapeutique. Dans cette étude, nous avons cherché à développer une méthode simple, rapide et efficace pour la détermination du voriconazole dans le plasma en utilisant la CLHP-UV en phase inversée. Nous avons également cherché à valider la méthode et à l’appliquer aux patients immunodéprimés.

Matériel et méthodes

Les échantillons de plasma de patients immunodéprimés ont été soumis à une déprotéinisation avec de l’acétonitrile suivie d’une centrifugation. La séparation chromatographique a été effectuée sur une colonne C18 avec détection UV à 254 nm en mode isocratique. Les concentrations ont été calculées en comparant les surfaces des pics à celles de l’étalon interne, le kétoconazole. La méthode a été validée à l’aide du profil d’exactitude, qui utilise une courbe d’étalonnage établie pour la gamme thérapeutique de 1 à 5,5 μg/mL.

Résultats

La méthode développée nécessite un temps d’analyse réduit, avec un temps de rétention du voriconazole d’environ 5,5 min. En outre, aucune interférence avec la matrice biologique n’a été détectée. Les récupérations obtenues étaient supérieures à 90 %. Le profil d’exactitude a montré que la méthode était exacte et précise.

Conclusion

La méthode développée est simple, efficace et nécessite une préparation minimale de l’échantillon. Elle peut être utilisée en routine pour le suivi thérapeutique du voriconazole.