Avaliação de kits comerciais baseados em PCR multiplex em tempo real para diagnóstico de meningite bacteriana.

Abstract

A meningite bacteriana (MB) continua sendo um problema mundial e uma grave ameaça à saúde pública. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho de três kits comerciais (ALLPLEX™ Meningitis-B Assay/Seegene Inc., Coreia do Sul; VIASURE™ H.influenzae, N.meningitidis & S.pneumoniae Real Time PCR Detection Kit/CerTest Biotec, Espanha; XGEN™ Multi MB/Mobius Life Science, Brasil) para a detecção simultânea de Neisseria meningitidis (Nm), Streptococcus pneumoniae (Spn) e Haemophillus influenzae (Hi). O desempenho de três kits comerciais foi comparado com o ensaio molecular “in house” utilizado rotineiramente no Instituto Adolfo Lutz/SP/Brasil (IAL). Tanto os ensaios comerciais quanto os “in house” são baseados no ensaio de PCR multiplex em tempo real (mqPCR). O mqPCR padronizado pelo IAL (mqPCR/IAL) foi introduzido na rotina diagnóstica da MB desde 2010 e foi considerado teste de referência neste estudo. Um total de 100 amostras clínicas (líquido cefalorraquidiano= 62; soro= 38) foram testadas usando os três kits comerciais mqPCR em comparação com o ensaio mqPCR/IAL, sendo 93 positivas para Nm, Spn ou Hi e 7 negativas. Para amostras de DNA-CSF, os resultados dos kits ALLPLEX™, VIASURE™ e XGEN™ apresentaram alta concordância com o ensaio mqPCR/IAL, apresentando mais de 93% de concordância e índice Kappa entre 0,61 e 0,80. Para amostras de DNA-soro, apenas o kit VIASURE™ foi comparado com o ensaio mqPCR/IAL, apresentando 100% de similaridade de concordância e índice Kappa = 1. Todos os três kits provaram ser competentes para detecção qualitativa de Nm, Spn e Hi e podem ser utilizados no diagnóstico de rotina da MB.