Studies of the Bovine Enterotoxigenic Escherichia coli Bacterins Containing K99 Antigen.

Abstract

K99抗原を含有する牛大腸菌不活化ワクチン(米国、SBAH社)及びシード株を入手し、シード株の各種性状、K99抗体価測定法の検討及び感染防御試験を行った.また、併せて全国的な疫学調査を実施した.シード株のプラスミド解析を行ったところ、本株は4種の安定なプラスミドを保有し、K99線毛抗原産生と耐熱性毒素(STa)産生の遺伝形質は、67Mdのプラスミドによって発現されることが明らかにされた.血清型はO101、K99、F41で、本株は、国内で分離される主要な腸管毒素原性大腸菌(ETEC)と同じ抗原構造をもち、ワクチン株として日本においても好適と考えられた.ワクチン効果判定のためのK99抗体価測定法として受身血球凝集反応(PHA法)を確立し、従来用いられている菌体凝集反応と比較した.両者間には高い相関(r=0.879)が認められ、またPHA法は幾何平均で2.5倍高い値を示した.PHA法は菌体凝集反応に比べ安定、簡便で感度が良く、有用なK99抗体価測定法と考えられた.感染防御試験では、ワクチン接種母牛由来の子牛をワクチン群、非接種母牛からの子牛を対照群とし、ETECで攻撃し、その防御能を検討した.攻撃後ワクチン群は全頭耐過生存した.一方、対照群は水様性下痢から全頭死亡し、本ワクチンのK99移行抗体を介する新生子牛への感染防御能の付与が確認された.疫学調査では、1道20県から30日齢以下の下痢子牛270頭の直腸スワブを集め大腸菌を分離したところ、33頭(12.2%)由来の株がETECと同定された.これらETEC検出子牛33頭中29頭(87.9%)は5日齢以下で水様便を呈していた.ETECの検出率及び検出状況は諸外国の報告とほぼ同様であり、わが国においてもETECが新生子牛の下痢に強く関与していることが明らかにされた。