İnsan Akciğer Kanser LC-3 Hücre Hatlarında Trpm5 İyon Kanalının Otofajik Hücre Ölümündeki Rolünün Araştırılması

Türkiye Klinikleri Archives of Lung Pub Date : 1900-01-01 DOI:10.5336/ARCHLUNG.2018-61866

Siyami Aydin, A. E. Balci, Ebru Önalan, Ahmet Tektemur, Muharrem Çakmak

{"title":"İnsan Akciğer Kanser LC-3 Hücre Hatlarında Trpm5 İyon Kanalının Otofajik Hücre Ölümündeki Rolünün Araştırılması","authors":"Siyami Aydin, A. E. Balci, Ebru Önalan, Ahmet Tektemur, Muharrem Çakmak","doi":"10.5336/ARCHLUNG.2018-61866","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"ÖZET Amaç: Akciğer kanserli dokularda, iyon kanalı olan transient reseptör potansiyel melastatin (TRPM) grubu TRPM2, 4, 5, 7, 8 ile Piezo 1, 2’nin RNA ekspresyonları çalışılmış ve adenokanserli hastalarda, TRPM5 iyon kanalı seviyesinin çok yüksek olduğu, otofajik aktiviteyi bloke ettiği saptanmıştır. Bu çalışmada, akciğer adenokanserli hücre hattında Microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3-TRPM5 (LC3-TRPM5) geninin durdurulmasıyla otofajik genlerin aktivasyonunun, dolayısıyla kanser hücrelerinin yok edilmesinin sağlanıp, sağlanamayacağının belirlenmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: A549 adeno kanser hücre hattı sırasıyla, hücre beslenmesi, pasajlanması, dondurulması ve çözdürülmesi, siRNA uygulaması, total RNA izolasyonu, spektrofotometrik RNA ölçümü, komplementer DNA sentezi, kantitatif gerçek zamanlıpolimeraz zincir reaksiyonu ile cDNA çoğaltımı işlemlerine tabi tutuldu. Sonuçlar değerlendirildi. Bulgular: A549 adeno kanser hücre hattı üzerinde yapılan kantitatif real timepolimeraz zincir reaksiyon analizi bulgularına göre, TRPM5 siRNA’sının %83 oranında baskılandığı, kontrol siRNA ve TRPM5 siRNA gruplarında otofajik genlerin sayısında iki kat artış olduğu görüldü. Sonuç: TRPM5-siRNA uygulaması, otofajik yollardaki genlerin ekspresyonunu açıkça artırmaktadır. TRPM5 süpresyonunun, otofajik mekanizmaları harekete geçirdiği, otofaji ile kanserli hücrelerin ölümüne yol açtığı saptanmıştır. TRPM5 otofajisi hedef alınarak inhibisyon ya da aktivasyon yapılabilmektedir. Bu durum, akciğer kanserli hücrelerde kanserli hücrelerin otofajik ölümüne yol açan kanser tedavilerinin geliştirilmesine katkıda bulunabilmektedir.","PeriodicalId":221529,"journal":{"name":"Türkiye Klinikleri Archives of Lung","volume":"35 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"1900-01-01","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Türkiye Klinikleri Archives of Lung","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.5336/ARCHLUNG.2018-61866","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}

引用次数: 0

Abstract

ÖZET Amaç: Akciğer kanserli dokularda, iyon kanalı olan transient reseptör potansiyel melastatin (TRPM) grubu TRPM2, 4, 5, 7, 8 ile Piezo 1, 2’nin RNA ekspresyonları çalışılmış ve adenokanserli hastalarda, TRPM5 iyon kanalı seviyesinin çok yüksek olduğu, otofajik aktiviteyi bloke ettiği saptanmıştır. Bu çalışmada, akciğer adenokanserli hücre hattında Microtubule-associated protein 1A/1B-light chain 3-TRPM5 (LC3-TRPM5) geninin durdurulmasıyla otofajik genlerin aktivasyonunun, dolayısıyla kanser hücrelerinin yok edilmesinin sağlanıp, sağlanamayacağının belirlenmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntemler: A549 adeno kanser hücre hattı sırasıyla, hücre beslenmesi, pasajlanması, dondurulması ve çözdürülmesi, siRNA uygulaması, total RNA izolasyonu, spektrofotometrik RNA ölçümü, komplementer DNA sentezi, kantitatif gerçek zamanlıpolimeraz zincir reaksiyonu ile cDNA çoğaltımı işlemlerine tabi tutuldu. Sonuçlar değerlendirildi. Bulgular: A549 adeno kanser hücre hattı üzerinde yapılan kantitatif real timepolimeraz zincir reaksiyon analizi bulgularına göre, TRPM5 siRNA’sının %83 oranında baskılandığı, kontrol siRNA ve TRPM5 siRNA gruplarında otofajik genlerin sayısında iki kat artış olduğu görüldü. Sonuç: TRPM5-siRNA uygulaması, otofajik yollardaki genlerin ekspresyonunu açıkça artırmaktadır. TRPM5 süpresyonunun, otofajik mekanizmaları harekete geçirdiği, otofaji ile kanserli hücrelerin ölümüne yol açtığı saptanmıştır. TRPM5 otofajisi hedef alınarak inhibisyon ya da aktivasyon yapılabilmektedir. Bu durum, akciğer kanserli hücrelerde kanserli hücrelerin otofajik ölümüne yol açan kanser tedavilerinin geliştirilmesine katkıda bulunabilmektedir.

查看原文本刊更多论文

摘要目的：研究了肺癌组织中瞬时受体电位美司他汀（TRPM）组TRPM2、4、5、7、8和Piezo 1、2等离子通道的RNA表达情况，发现TRPM5离子通道水平很高，阻断了腺癌患者的自噬活性。本研究旨在确定是否可以通过阻断肺腺癌细胞系中的微管相关蛋白 1A/1B-轻链 3-TRPM5 （LC3-TRPM5）基因来激活自噬基因，从而达到消灭癌细胞的目的。材料与方法：对 A549 腺癌细胞株进行细胞饲养、传代、冻融、siRNA 应用、总 RNA 分离、分光光度法 RNA 测定、互补 DNA 合成、实时定量聚合酶链反应和 cDNA 扩增。对结果进行了评估。结果：根据对 A549 腺癌细胞系的实时定量聚合酶链反应分析结果，TRPM5 siRNA 的抑制率为 83%，对照 siRNA 组和 TRPM5 siRNA 组的自噬基因数量增加了 2 倍。结论TRPM5-siRNA处理明显增加了自噬通路中基因的表达。研究发现，TRPM5抑制可激活自噬机制，导致自噬和癌细胞死亡。TRPM5自噬可被定向抑制或激活。这可能有助于开发能导致肺癌细胞自噬死亡的癌症疗法。

本文章由计算机程序翻译，如有差异，请以英文原文为准。

求助全文

约1分钟内获得全文求助全文

来源期刊

Türkiye Klinikleri Archives of Lung

自引率

0.00%

发文量