COMPARACIÓN DE 3 MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE DNA A PARTIR DE CÉLULAS CERVICALES PARA LA AMPLIFICACIÓN DE UN FRAGMENTO DEL GEN Β-GLOBINA HUMANA POR PCR

Abstract

En este trabajo se compararon 3 métodos de extracción de DNA: Fenol-cloroformo-alcohol isoamílico, Congelación/descongelación y Column ReliaPrep Blood gDNA Miniprep System. Para la extracción de DNA se emplearon muestras concentradas y diluidas (1/10) de células cervicales obtenidas por barrido cervical de mujeres proce- dentes de Cochabamba – Bolivia, utilizando como indicador de calidad de extracción de DNA a la amplificación por PCR del fragmento de 268 pb correspondiente a una región del gen β-globina. El análisis de la secuencia de cebadores empleados en PCR (GH20 forward y PC04 reverse) reveló que GH20(F) tiene la capacidad de dimerizar con una sola conformación, mientras que PC04(R) podría dimerizar con 5 conformaciones diferentes, sin embargo, se recomienda el uso de estos cebadores puesto que el ∆G de todas estos dímeros no representa una energía favorable, permitiendo una correcta amplificación. El presente artículo reporta la extracción exitosa de DNA a partir de muestras diluidas y concentradas de células cervicales empleando el método de congelación/descongelación y el método con Columna Relia - Prep. Sin embargo, con el método de fenol-cloroformo-alcohol isoamílico no se obtuvieron resultados de extracción de DNA.Fecha de recepción: 23/04/2020   ¦¦   Fecha de aprobación: 24/07/2020