Hb Köln [ a 2 b 298(FG5) val-met] identified by DNA analysis in a Brazilian family

Abstract

Hb Koln resulta da substituicao do aminoacido valina por metionina na posicao 98 da cadeia da hemoglobina. Embora seja a mais frequente das hemoglobinas instaveis, possui poucas caracteristicas que permitem distinguila sem a realizacao de analise estrutural da molecula. Com o objetivo de desenvolver um procedimento alternativo a analise proteica, este trabalho descreve a identificacao da Hb Koln atraves de analise de DNA. Uma paciente branca, sexo feminino, 4 anos de idade, com ictericia desde o nascimento, foi analisada, apresentando uma banda anomala entre A2 e S em eletroforese em acetato de celulose, e migracao eletroforetica semelhante a Hb C em gel de agar. Os testes de instabilidade termica e de precipitacao pelo isopropanol foram positivos e foram observados corpusculos de Heinz no sangue periferico. Os tres exons do gene da globina foram sequenciados e uma transicao de G ® A foi identificada na primeira posicao do codon 98. Essa alteracao nao cria ou abole nenhum sitio conhecido de enzima de restricao. Desta forma, a confirmacao da mutacao foi levada a efeito atraves de hibridizacao com oligonucleotideos aleloespecificos, o que permitiu o estabelecimento de um metodo simples e rapido de identificacao de novos casos quando os dados clinicos e o padrao hematologico e eletroforetico sugerem Hb Koln.