Préparation d’échantillons pour analyses en immunochimie

Abstract

Introduction : Malgre l’essor des techniques chromatographiques couplees a la spectrometrie de masse, l’immunoanalyse revet toujours une importance capitale dans les laboratoires hospitaliers et de medecine legale. Nous nous attacherons ici a decrire quels pourraient etre les protocoles a mettre en œuvre pour utiliser ces tests immunochimiques sur des matrices non conventionnelles (sang total laque, cheveux…) et sur les preparations necessaires pour analyser ces echantillons. Methodes : Differentes techniques immunochimiques avec leur aptitude a accepter des matrices dites alternatives seront evoquees. Une application utilisant une defecation du sang total avec de l’acetone est proposee. Quatre parametres importants en toxicologie (paracetamol, phenobarbital, digoxine et valproate de sodium) ont ete testes sur plasma et sur sang total avec cette technique. Les correlations entre les resultats obtenus sont presentees. Un point particulier est fait sur la preparation d’echantillons en vue de l’analyse de matrices alternatives (cheveux, humeur vitree, salive…) avec des methodes immunochimiques. Resultats : La procedure presentee ici pour l’analyse du paracetamol, du phenobarbital, de la digoxine et du valproate de sodium dans le sang total par methode CEDIA donne de bons resultats avec des correlations satisfaisantes entre les valeurs obtenues sur plasma le jour du prelevement et les valeurs obtenues sur sang total quelques semaines apres. Conclusion : Les avantages des tests immunochimiques sont bien connus; ils peuvent etre automatisables, permettent une grande cadence et un resultat rapide. Leur utilisation en toxicologie medico-legale reste compliquee par la nature des echantillons disponibles. S’ils peuvent etre utiles dans un but de screening, une confirmation par methode chromatographique reste indispensable.