TESTE DE SENSIBILIDADE PELO MÉTODO DE MICRODILUIÇÃO EM CALDO: PROPOSTA DE UM MEIO ALTERNATIVO

Abstract

Introdução: Através do método de referência padrão desenvolvido pelo Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) é possível realizar o teste de susceptibilidade antifúngica e determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de leveduras que causam infecções fúngicas invasivas, incluindo as espécies de Candida e Cryptococcus neoformans. No entanto, alguns problemas limitam esse teste, como o uso do meio de cultura RPMI-1640 e o tampão MOPS [ácido3- (N-morfolino) propanosulfônico], que possuem um alto custo, tornando o teste inviável para laboratórios com recursos limitados. Objetivo: O objetivo deste trabalho foi comparar a concentração inibitória mínima de Candidas spp. frente ao antifúngico fluconazol, nos meios de cultura RPMI-1640 (protocolo M27-A4) e Sabouraud dextrose modificado. Material e métodos: O meio Sabouraud dextrose modificado (glicose 5 g/L e peptona de soja 10 g/L) foi tamponado com Tris-HCl e o RPMI-1640, conforme recomendação na Norma M27-A4, tamponado com o tampão MOPS. Ambos os meios foram tamponados na concentração final de 0,165 mol/L, pH 7,0. Os microrganismos testados frente a fluconazol foram C. albicans ATCC 36232, C. glabrata ATCC 2001, C. guilliermondi ATCC 6260 e C. tropicalis ATCC 13803. A temperatura de incubação foi de 35 °C e o tempo de incubação de 24 horas. Resultados: Neste estudo, Sabouraud dextrose modificado mostrou uma capacidade equivalente ao uso do meio RPMI-1640 para determinar a concentração inibitória mínima das leveduras patogênicas testadas. Conclusão: Para o teste de microdiluição em caldo (protocolo M27-A4), ambos os meios demostraram o mesmo resultado frente ao antifúngico fluconazol, demostrando a possibilidade do uso do meio Sabouraud modificado tamponado com Tris- HCl em laboratórios com recursos limitados.