Die Auftrennung der Serumproteine verschiedener Haussäugetiere in der Trägerelektrophorese

Zusammenfassung Unter bestimmten Bedingungen auftretende Faktoren, wie heterogene Verhaltnisse im elektrischen Feld und Agargel oder zu grose Konzentrationsunterschiede im Salzgehalt zwischen Serum und Gelpuffer, sind die Ursache dafur, das durch Deformationserscheinungen der Proteinbanden und durch auftretende Verschmierungseffekte schlecht auswertbare Elektropherogramme erhalten werden. Versuche uber die Verfahrenstechnik zur Darstellung geeigneter Platten fur eine reproduzierbare, quantitative Analyse zeigen deren Abhangigkeit vom Fixierungs-, Anfarbe- und Spulprozes. Methanolhaltige Farbeflotten mit Amidoschwarz 10 B sowie methanolische Waschlosungen eignen sich nicht. Bei ihnen macht sich das unterschiedliche Farbstoffbindungsvermogen der Proteine bemerkbar, denn bei nicht streng eingehaltenen Entfarbezeiten wirkt sich der schnelle Farbstoffverlust der Globulinfraktionen auf die Auswertung nachteilig aus. Aus den Untersuchungen wird eine Standardmethode fur die Agarelektrophorese tierischer Seren vorgeschlagen. Summary Separation of serum proteins by gel electrophoresis 1. Contribution to the technique Under certain conditions, factors such as heterogeneous relationships in the electric field and in the agar gel, or too large concentration differences in the salt content as between serum and gel buffer, cause distortion of the protein bands and the resulting blurring effects which make it difficult to evaluate the electropherogram. Studies on the technique for the preparation of suitable plates for a reproducible quantitative analysis show how dependent one is on the processes of fixation, staining and washing. Staining solutions containing methanol and rinsing solutions containing methanol are unsuitable. Their use makes the different proteins stain with differing intensity because by insufficient staining the globulin fractions lose the stain rapidly and produce an unfavourable result. From the author's experience a standard method for agar gel electrophoresis of animal sera is proposed. Resume La separation des proteines seriques chez divers mammiferes domestiques par electrophorese sur gel. 1ere Communication: Contribution a la technique de l'electrophorese sur gel d'agar-agar Certains facteurs accidentels comme un champ electrique non homogene ou de trop grandes differences de concentration saline entre le serum et le systeme tampon du gel sont la cause de deformations des bandes de proteines. et par les effets qui en decoulent, on obtient des diagrammes electrophoretiques difficiles a interpreter. Des essais concernant la technique d'obtention de plaques adequates pour une analyse quantitative reproductible montrent leur dependance des processus de fixation, de coloration et de rincage. Des solutions de coloration contenant du methanol avec de «l'amidoschwarz 10 B» ainsi que des solutions de lavage au methanol ne conviennent pas. Leur emploi souligne trop les differences du pouvoir de fixation du colorant des differentes proteines, car si l'on n'observe pas exactement les temps de differenciation, la decoloration rapide des fractions de globuline ont une action defavorable sur les resultats. Ces recherches aboutissent a la proposition d'une methode standard pour l'electrophorese sur gelose de serums d'origine animale. Resumen Separacion de las seroproteinas de diversos mamiferos domesticos en la electroforesis porteadora. 1 a comunicacion: Contribucion a la ingenieria quimica de electroforesis sobre agar Bajo determinadas condiciones surjen factores, tales como condiciones heterogeneas en el campo electrico y en el gel de agar o diferencias de concentracion demasiado grandes en el contenido salino entre el suero y el tampon gelificado, los cuales son causa de que por manifestaciones deformadoras de las bandas proteicas y por efectos de ensuciamiento que surjen se obtengan electroferogramas mal evaluables. Ensayos acerca de la ingenieria quimica para la elaboracion de placas apropiadas para un analisis cuantitativo reproducible muestran su dependencia del proceso de fijacion, coloracion y lavado. No resultan apropiadas flotas de tincion que contienen metanol con amidonegro 10 B, asi como tampoco soluciones de lavado a base de metanol. En ellas se nota la diferente capacidad de fijacion de colorantes por parte de las proteinas, pues al no cumplirse con exactitud los tiempos de decoloracion, la rapida perdida de colorante de las fracciones globulinicas se refleja desfavorablemente sobre la valoracion. Como resultado de las investigaciones, se propone una ticnica standard para la electroforesis sobre agar de los sueros sanguineos animales. Herrn E. Schlotterer danke ich fur aufgeschlossene Mitarbeit.