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La cuenca del río Uruguay se extiende a través de Brasil, Argentina y Uruguay y es una de las redes fluviales fundamentales para la ocupación humana del sudeste de Sudamérica. Desde sus nacientes hasta su desembocadura y desde el Pleistoceno final hasta la actualidad, este río presenta evidencias arqueológicas y etnohistóricas de ocupaciones indígenas. En este marco, este artículo constituye una síntesis regional de la historia de estas ocupaciones y del desarrollo de las investigaciones arqueológicas en los tres países mencionados. Primero, se expone el contexto ambiental y los estudios arqueológicos realizados. Posteriormente, se presentan los sitios arqueológicos y los artefactos más relevantes para la transición Pleistoceno-Holoceno, Holoceno temprano y Holoceno medio. Por último, se caracteriza el registro arqueológico Taquara-Itararé, Goya-Malabrigo y guaraní correspondiente al Holoceno tardío. La información presentada permite reconocer al río Uruguay y sus afluentes como el escenario de una compleja dinámica poblacional, caracterizada por la articulación de un gran número de poblaciones, cultural y lingüísticamente diversas, durante más de 12.000 años.