Estimation quantitative du taux des sous-classes d'IgG sériques par une méthode immunoenzymatique

Abstract

Nous avons mis au point une technique immunoenzymatique (ELISA) pour la mesure du taux des sous-classes d'IgG en utilisant des anticorps spécifiques monoclonaux. La capacité de ces anticorps à réagir avec les 4 sous-classes d'IgG a été évaluée dans les conditions expérimentales décrites pour les mesures. La capture des anticorps monoclonaux anti sousclasse est réalisée par un anti Fc d'IgG de souris. La technique est sensible : capable de détecter des concentrations de l'ordre du ng/ml et précise : le cœfficient dev ariation inter-essais est de 14 %. En utilisant le sérum de référence OMS 67/97, nous avons étalonné un pool de sérums réalisé à partir de 100 donneurs. De plus, la concentration de chaque sous-classe a été évaluée dans 69 sérums d'adultes sains afin d'étudier la distribution du taux des différentes sous-classes. Un cœfficient de corrélation de 0,78 a été obtenu entre le taux des IgG mesurées par immunonéphélémétrie et la somme des sous-classes d'IgG chez ces mêmes 69 sujets.

We developped a enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for measuring IgG subclasses concentration in serum. For this we used monoclonal antibodies. The specificity of these antibodies was evaluated with a panel of myeloma proteins belonging to the 4 IgG subclasses. The ELISA was sensitive (allowing the detection of subclasses at ng level) and accurate (inter-assay cœfficient of variation of 14 %). Using the WHO serum 67/97 as reference, we determined the concentration of IgG subclasses in a pool of sera. In addition concentrations were measured in 69 healthy adults to study the distribution of each IgG subclass. A good correlation (r = 0.78) was obtained between the sum of the subclasses measured by ELISA and total IgG measured by immunonephelemetry.