外周血间充质干细胞培养视网膜细胞：色素性视网膜炎患者细胞治疗的潜在策略。

视网膜色素变性（RP）是一组遗传性视网膜疾病，其特征是感光细胞进行性变性，导致失明。细胞疗法提供了一个有希望的方法来治疗进行性视网膜变性观察到RP。外周血间充质干细胞（PBMSCs）由于其可获得性和分化成各种细胞类型的能力，已成为此类治疗的潜在细胞来源。本研究旨在分离和分化PBMSCs为视网膜细胞，作为RP患者再生医学和细胞治疗的途径。方法和材料：经眼科医生鉴定为RP患者，并通过分子遗传学技术（包括全外子组测序（WES）和Sanger测序）确认疾病后，使用Ficoll分离液从外周血样本中分离出PBMSCs，并在含20% FBS的DMEM/F12培养基中培养。通过流式细胞术分析传代2 （P2）细胞，用CD73、CD90、CD105、CD34和CD45标记物表征PBMSCs。在牛磺酸、视黄酸、hbFGF、hEGF、l -谷氨酰胺等分化因子作用下，将细胞分化为视网膜细胞。Western blot检测nestin、vimentin、CRX和rhodopsin的表达，确认分化细胞的身份。方差分析和t检验用于检验至少三个试验中提供的Western blot数据。结果：WES结果显示，在RPGR基因中存在21个核苷酸（c.2541-2561 del）的纯合缺失，Sanger测序证实了这一结果，这是一种与RP相关的新型致病突变。培养后2-3周内出现梭形PBMSCs。P2细胞显示CD90、CD73和CD105，但未检测到CD34和CD45的表达，证实了PBMSCs的正确分离。诱导分化后，Western blot分析显示nestin、vimentin、CRX、rhodopsin蛋白高表达（p = 0.05），证实PBMSCs向视网膜细胞分化。结论与讨论：分离和分化PBMSCs为视网膜细胞治疗RP患者提供了一种很有前景的方法。通过利用PBMSCs的再生潜力，有可能替代RP患者丢失或功能失调的视网膜细胞并恢复视觉功能。然而，需要进一步的研究来克服现有的挑战，并将这些发现转化为临床使用的有效疗法。