Analyse moléculaire des vésicules extracellulaires du liquide folliculaire chez les femmes infertiles

Q3 Medicine

Morphologie Pub Date : 2024-11-26 DOI:10.1016/j.morpho.2024.100813

Solène Ducarre , Regina Maria Chiechio , Ester Butera , Christophe Penno , Abdelhak El Amrani , Claire Heichette , Pascale Even-Hernandez , Valérie Marchi , Célia Ravel

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Abstract

Introduction

Le liquide folliculaire ovarien est particulièrement riche en vésicules extracellulaires (EVs) provenant des cellules de la granulosa. Ces EVs présentent une grande diversité et ont un rôle biologique majeur [1]. Elles sont captées par le complexe cumulus-ovocyte et contiennent des facteurs impliqués dans la compétence ovocytaire.

Matériel et méthodes

Les échantillons ont été fournis par le CRB GERMETHEQUE, dédiée à la fertilité humaine. Au total, 22 pools de quatre patientes présentant le même phénotype d’infertilité d’origine ovarienne (insuffisance ovarienne [IO] ou syndrome des ovaires polykystiques [SOPK]) ont été analysés. L’analyse de diffusion dynamique de la lumière a été réalisée à l’aide d’un Nanosizer ZEN3600. Les spectres d’absorption ont été réalisés sur un spectromètre UV-Vis. NanoDrop™.

Enfin, les miRNAs contenus dans ces EVs ont été séquencés (NGS Illumina).

Résultat

L’absorbance protéique des EVs des patientes SOPK est supérieure à celle des patientes IO. Les patientes SOPK présentent des taux de protéines supérieurs à la moyenne, mais avec une taille et concentration normales d’EVs, contrairement aux patientes IO. Il existe des miARNs surexprimés uniquement dans les EVs de petite taille tels que miR-4449 et miR-320A. De plus miR210HG et miR182 sont surexprimés et miR25 est sous-exprimé chez les patientes IO par rapport aux témoins.

Discussion

Cette analyse démontre que les concentrations de protéines, ainsi que la taille et la concentration des EVs, sont influencées par la physiologie ovarienne. Cette approche innovante permettrait une première discrimination des deux pathologies d’infertilité grâce à des techniques simples et rapides (UV-Vis et DLS). Le diagnostic rapide et non invasif de ces pathologies ouvre ainsi une nouvelle voie dans ce domaine [2]. Le contenu de ces EVs pouvant influencer la compétence des ovocytes et donc la capacité reproductrice des femmes, ces premiers résultats permettent de mieux comprendre les signatures moléculaires d’infertilité d’origine ovarienne.

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不孕妇女卵泡液细胞外囊泡的分子分析

引言卵巢滤泡液中含有特别丰富的细胞外囊泡 (EVs)，这些囊泡来自颗粒细胞。这些 EVs 种类繁多，具有重要的生物学作用 [1]。它们被积液-卵母细胞复合体吸收，并含有与卵母细胞能力有关的因子。材料与方法样本由专门研究人类生育能力的 CRB GERMETHEQUE 提供。共分析了来自四名具有相同卵巢不孕表型（卵巢发育不全或多囊卵巢综合征）患者的 22 个样品池。使用 Nanosizer ZEN3600 进行了动态光散射分析。吸收光谱在 UV-Vis 上进行。结果多囊卵巢综合征患者的 EVs 蛋白吸光度高于 IO 患者。多囊卵巢综合征患者的蛋白水平高于平均水平，但与卵巢癌患者不同，其EV大小和浓度均正常。有一些 miRNA 只在小的 EV 中过表达，如 miR-4449 和 miR-320A。此外，与对照组相比，卵巢癌患者的 miR210HG 和 miR182 表达过高，而 miR25 表达过低。这种创新方法可利用简单、快速的技术（紫外可见光和 DLS）对两种不孕症病理进行初步鉴别。因此，对这些病症的快速、无创诊断为该领域开辟了一条新途径[2]。由于这些 EVs 的含量会影响卵母细胞的能力，从而影响妇女的生殖能力，因此这些初步结果有助于更好地了解卵巢性不孕症的分子特征。

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来源期刊

Morphologie Medicine-Anatomy

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期刊介绍： Morphologie est une revue universitaire avec une ouverture médicale qui sa adresse aux enseignants, aux étudiants, aux chercheurs et aux cliniciens en anatomie et en morphologie. Vous y trouverez les développements les plus actuels de votre spécialité, en France comme a international. Le objectif de Morphologie est d?offrir des lectures privilégiées sous forme de revues générales, d?articles originaux, de mises au point didactiques et de revues de la littérature, qui permettront notamment aux enseignants de optimiser leurs cours et aux spécialistes d?enrichir leurs connaissances.