Proteomic analysis of human lenses nucleus in cataractous eye

Abstract

目的 研究年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白的组成.方法 取12例年龄相关性白内障晶状体软核,提取晶状体核中的水溶性蛋白及尿溶性蛋白进行二维电泳及UPD-蛋白质染料染色试剂盒对凝胶染色后,用Image Master 2D Platinum 6.0软件对获得的蛋白图谱进行分析,再利用MALDI-TOF MS分析及数据库搜索对差异表达的蛋白质点进行鉴定.结果 二维电泳结果显示,年龄相关性白内障晶状体核中水溶性蛋白和尿溶性蛋白大部分为相对分子质量14 400～97 400,pI 5～9.高丰度蛋白质斑点相对分子质量分布在20 000～31 000,pI 6～8区域内.年龄相关性白内障晶状体核水溶性蛋白二维电泳图识别出31个蛋白质斑点,尿溶性蛋白二维电泳图识别出26个蛋白质斑点,相差2倍以上表达的差异点有14个.对选取的蛋白质斑点进行MALDI-TOF MS分析,经数据库检索后鉴定出6种蛋白质,其中3种蛋白质表达下调(γS-晶状体蛋白、βA3-晶状体蛋白、βA4-晶状体蛋白),1种蛋白质表达上调(βB1-晶状体蛋白),2种蛋白质表达缺失(截取的人βB1-晶状体蛋白A链、截取的人γD-晶状体蛋白X链).结论 年龄相关性白内障晶状体核不同组分晶状体蛋白中主要由β-晶状体蛋白组成,与尿溶性晶状体蛋白相比,水溶性蛋白鉴定出γD-晶状体蛋白,而βA4-晶状体蛋白阙如。