Siirt Tiftik Keçisi Böbrek Dokusundan Karbonik Anhidraz Enziminin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Bazı Biyokimyasal Özelliklerinin Araştırılması

Erzincan University Journal of Science and Technology Pub Date : 2016-11-28 DOI:10.18185/EUFBED.33070

E. Yerlikaya, Hasan Karageçili, Ramazan Demirdağ, M. Kaya

{"title":"Siirt Tiftik Keçisi Böbrek Dokusundan Karbonik Anhidraz Enziminin Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Bazı Biyokimyasal Özelliklerinin Araştırılması","authors":"E. Yerlikaya, Hasan Karageçili, Ramazan Demirdağ, M. Kaya","doi":"10.18185/EUFBED.33070","DOIUrl":null,"url":null,"abstract":"Karbonik anhidrazlar (CA) (E.C:4.2.1.1) bakteri gibi en basit organizmalardan bitki ve hayvan gibi en kompleks canlilara kadar yaygin sekilde dagilmis cinko iceren bir grup metaloenzimdir. CA inhitorleri kopek ve kedilerin glukoma tedavisinde kullanilan baslica ilaclarin birkacidir. CA enzimleri daha onceki calismalarda afinite kromatografisi yontemi ile basarili bir sekilde koyun, tavuk, balik ve sigir gibi pekcok canlidan saflastirilmis ve karakterize edilmistir. Bu calismada ise CA enzimi, Siirt Tiftik Kecisi bobrek dokusundan Sepharose-4B-L-tirozin-sulfanilamid afinite kolonu kullanilarak 902,9 EU x mg -1 spesifik aktivite ile % 50,19 verimle 83,54 kat saflastirildi. Saflastirilan enzimin safligi SDS-PAGE ile dogrulandi. Tris-HCI tamponu kullanilarak enzimin optimum iyonik siddeti 25 mM olarak belirlendi. Enzimin optimum pH‘si pH=8,5 olarak belirlendi. Enzimin optimum sicakligi 45 oC olarak bulundu. Siirt Tiftik Kecisi bobrek CA enzimi icin stabil pH=7,0 olarak belirlendi. Saflastirilan CA enzimi uzerine bazi metal iyonlarinin inhibitor etkileri incelendi. Inhibisyon gosteren metallerin IC 50 degerlerini bulmak amaciyla inhibisyon grafikleri cizildi.","PeriodicalId":212034,"journal":{"name":"Erzincan University Journal of Science and Technology","volume":"82 1","pages":"0"},"PeriodicalIF":0.0000,"publicationDate":"2016-11-28","publicationTypes":"Journal Article","fieldsOfStudy":null,"isOpenAccess":false,"openAccessPdf":"","citationCount":"0","resultStr":null,"platform":"Semanticscholar","paperid":null,"PeriodicalName":"Erzincan University Journal of Science and Technology","FirstCategoryId":"1085","ListUrlMain":"https://doi.org/10.18185/EUFBED.33070","RegionNum":0,"RegionCategory":null,"ArticlePicture":[],"TitleCN":null,"AbstractTextCN":null,"PMCID":null,"EPubDate":"","PubModel":"","JCR":"","JCRName":"","Score":null,"Total":0}

引用次数: 0

Abstract

Karbonik anhidrazlar (CA) (E.C:4.2.1.1) bakteri gibi en basit organizmalardan bitki ve hayvan gibi en kompleks canlilara kadar yaygin sekilde dagilmis cinko iceren bir grup metaloenzimdir. CA inhitorleri kopek ve kedilerin glukoma tedavisinde kullanilan baslica ilaclarin birkacidir. CA enzimleri daha onceki calismalarda afinite kromatografisi yontemi ile basarili bir sekilde koyun, tavuk, balik ve sigir gibi pekcok canlidan saflastirilmis ve karakterize edilmistir. Bu calismada ise CA enzimi, Siirt Tiftik Kecisi bobrek dokusundan Sepharose-4B-L-tirozin-sulfanilamid afinite kolonu kullanilarak 902,9 EU x mg -1 spesifik aktivite ile % 50,19 verimle 83,54 kat saflastirildi. Saflastirilan enzimin safligi SDS-PAGE ile dogrulandi. Tris-HCI tamponu kullanilarak enzimin optimum iyonik siddeti 25 mM olarak belirlendi. Enzimin optimum pH‘si pH=8,5 olarak belirlendi. Enzimin optimum sicakligi 45 oC olarak bulundu. Siirt Tiftik Kecisi bobrek CA enzimi icin stabil pH=7,0 olarak belirlendi. Saflastirilan CA enzimi uzerine bazi metal iyonlarinin inhibitor etkileri incelendi. Inhibisyon gosteren metallerin IC 50 degerlerini bulmak amaciyla inhibisyon grafikleri cizildi.

查看原文本刊更多论文

碳酸酐酶（CA）（E.C:4.2.1.1）是一组含锌金属酶，广泛分布于从最简单的生物（如细菌）到最复杂的生物（如植物和动物）中。CA 抑制剂是治疗猫狗葡萄糖瘤的一些主要药物。许多物种（如羊、鸡、鱼和牛）的 CA 酶已成功地通过亲和层析法纯化和表征。在这项研究中，使用 Sepharose-4B-L-tyrosine-sulfanilamide 亲和柱纯化了 83.54 倍的 CA 酶，其特定活性为 902.9 EU x mg-1，产率为 50.19%，特定活性为 50.19%。纯化酶的纯度经 SDS-PAGE 验证。使用 Tris-HCl 缓冲液确定酶的最佳离子强度为 25 mM。酶的最适 pH 值为 pH=8.5。酶的最适温度为 45 摄氏度。确定 Siirt 安哥拉山羊肾 CA 酶的稳定 pH 值为 7.0。研究了一些金属离子对纯化 CA 酶的抑制作用。绘制了抑制作用图，以确定出现抑制作用的金属的 IC 50 值。

本文章由计算机程序翻译，如有差异，请以英文原文为准。

求助全文

约1分钟内获得全文求助全文

来源期刊

Erzincan University Journal of Science and Technology

自引率

0.00%

发文量