PERFIL DE ADSORÇÃO DE ÍONS NÍQUEL EM RESINAS CROMATOGRÁFICAS A BASE DE SÍLICA PARA PURIFICAÇÃO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES

Abstract

Uma das mais importantes contribuições da biotecnologia moderna é a produção de proteínas recombinantes. A inserção da cauda de poli-histidina (poli-his) em proteínas recombinantes, facilita o processo de purificação através da afinidade da histidina com metais na superfície de resinas cromatográficas. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de adsorção de íons níquel em sílica produzida nacionalmente e ativada com grupos IDA, para purificação de proteínas recombinantes. Nesta etapa do estudo, foi construída uma curva de calibração para quantificação de níquel em solução, permitindo avaliar a concentração desse íon metálico adsorvido à resina cromatográfica. O complexo níquel-IDA também foi avaliado quanto a sua estabilidade em condições comuns a processos de purificação, apresentando ótimos resultados. Nestes experimentos os íons níquel mantiveram-se adsorvidos na coluna, mesmo após testes de dessorção com altas concentrações de imidazol. A resina PY-IDA adsorveu 82,96 (± 16,58) mMols de níquel por grama de sílica ativada (PY-IDA). Futuros experimentos de purificação de proteínas